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人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格

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bbin注ce名称: 人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格
bbin注cexinghao: ALT
bbin注ce展商: ELISAshijihe
bbin注ce文档: 无xiangguan文档

简单介绍

人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格采用双bbin网址夹心ELISA法。用縢u薃LTbbin网址包被于酶标板上,实验时样pin或标准pin中的人ALT与包被bbin网謋ang岷希卫氲某煞直幌慈ァicijia入生wu素化的縢u薃LTbbin网址he辣gen过氧化wu酶标ji的亲he素。縢u薃LTbbin网址与结合在包被bbin网址上的人ALT结簒i⑸鷚u素与亲he素特异性结合er形成**复合wu,游离的成分被洗去。jia入显色diwu(TMB),TMB在辣gen过氧化wu酶的催化下呈现lan色,jia终止yehou变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人gu丙转氨酶(ALT)shijihenong度与OD450值之jian呈正比,通过绘zhi标譲i呒扑鉩hu样pin中人ALT的nong度。


人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格  的详xi介绍


人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格

使用说明书

gu丙转氨酶(ALT)shijihe基本yuanli:

采用双bbin网址夹心ELISA法。用縢u薃LTbbin网址包被于酶标板上,实验时样pin或标准pin中的人ALT与包被bbin网謋ang岷希卫氲某煞直幌慈ァicijia入生wu素化的縢u薃LTbbin网址he辣gen过氧化wu酶标ji的亲he素。縢u薃LTbbin网址与结合在包被bbin网址上的人ALT结簒i⑸鷚u素与亲he素特异性结合er形成**复合wu,游离的成分被洗去。jia入显色diwu(TMB),TMB在辣gen过氧化wu酶的催化下呈现lan色,jia终止yehou变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人ALTnong度与OD450值之jian呈正比,通过绘zhi标譲i呒扑鉩hu样pin中人ALT的nong度。

gu丙转氨酶(ALT)shijihemiao述:

英文名称 Human ALT (Alanine Transaminase) ELISA Kit
中文名称 人gu丙转氨酶(ALT)酶联**吸附测定shijihe
货hao X-EL-H0312c 种shu Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fang法 双bbin网址夹心法
检测fan围 0.313~20ng/mL ling敏度 0.188ng/mL

人gu丙转氨酶(ALT)shijihe价格zu成:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标板(ke拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

dong干标准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准pin&样pinxi释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nongsuo生wu素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化bbin网址xi释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuoHRP酶结合wu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合wuxi释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nongsuo洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

diwu溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注ce说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特bie说明
*: [96T/48T](打开包zhuanghouqingji时检查suo有wupin是否齐全完zheng)
#: 一周内使用ke存于4℃,需长时jian存fang或多ci使用建议存于-20.                                      

gu丙转氨酶(ALT)shijihe检测前准备gong作:

1. qing提前20分zhong从bing箱中取chushijihe,平衡zhishi温。

2. jiangnongsuo洗涤ye用双蒸水xi释(1:25)。未用完的fang回4℃。从bing箱中取chu的nongsuo洗涤yekeneng有结晶,shu于正常现象,ke用40℃水浴weijia热使结晶完全溶解hou再peizhi洗涤ye(jia热温度瞙ui?/span>50℃,使用时洗涤ye应weishi温)。当日使用。

3. 标准pin10000×g离心1分zhong,jia入标准pin&样pinxi释ye1.0mLzhidong干标准pin中,旋紧guan盖,静置10分zhong,上下颠倒数ci,待其充分溶解hou,用yiyeqijiang其轻轻混匀(nong度wei8000pg/mL)。然hougen据需要进行倍比xi释(注:瞙ui苯釉诜从ong中进行倍比xi释)。建议peizhi成yi下nong度:an照xi释fang法图例 标准pin&样pinxi释ye直接作wei空白kong0ng/mL。如peizhi5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的上述标准pinjia入含有0.5mL标准pin&样pinxi释ye的EPguan中,混匀即ke,其余nong度yi此类推。 

4. 生wu素化bbin网址gong作ye:实验前计算当ci实验suo需用量(yi100μL/kong计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。使用前15分zhong,yi生wu素化bbin网址xi释yexi释nongsuo生wu素化bbin网址(1:100)成gong作nong度。当日使用。

5. 酶结合wugong作ye:实验前计算当ci实验suo需用量(yi100μL/kong计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。使用前15分zhong,yi酶结合wuxi释yexi释nongsuoHRP酶结合wu(1:100)成gong作nong度。

当日使用。

gu丙转氨酶(ALT)shijihe标准pinxi释fang法图例ai▂i500μL/guanwei例,也kegen据实际用量来xi释,如200μL/guan)

            

1. 在各kong中jia入标准pin或样pin各100μL 37℃孵yu90分zhong

2. jia入100μ生wu素化bbin网址gong作ye,37℃孵yu60分zhong

3. 洗涤3ci

4. jia入100μL酶结合wugong作ye, 37℃孵yu30分zhong

5. 洗涤5ci

6. jia入90μLdiwu溶ye, 37℃孵yu15分zhong左右

7. jia入50μL终止ye,li即在450nm波长处测量OD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的影响ELISA操作步骤复za,操作不当jiang引起jiao大的wu差。yi下叙述各个步骤中的影响因素。

1.jia样

2.温yu

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、hui区的设置通常情况下,ELISA定性实验yi“阳性”he“阴性”来报告结果,liang者jian有一条分界线被称wei“阳性判duan值”(cut-off valueCO值),zhe是定性**测定结果报告的yi据。

三、标本复查ELISA手gong检测过程复za,影响因素jiao多,即使shi内质控在控,也keneng因kongjian差异er造成结果的差异,因此jia大复查力度是保证结果准确性的ke靠fang法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康膋e疑、弱阳性标本ji少见模式的检测结果进行复查。

si、结果判duanhe报告常用下列几种fang法表shi结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般yi滴度表shi。

3.定量测定 即用已知量的标准pin作一系列xi释hou进行ELISA测定,绘zhi标譲i撸峁鹹i优羓i炕虻ノ槐韘hi。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘zhixiang应的标譲i摺Ⅻ/span>

注意shi项:

仔xi阅du说明书。

检查shijihe标qian上的有效qi。如果超过有效qi,qingwu使用。

an说明书萬an╯uo有shiji齐全(数量、体积)。

标本zhi备要规fan,每份标本体积要an2-3个复kongyi上的量zhi备(贮存),jin量分zhuang做备份。短qi内无法实验者,注意低温保存。

准备好suo有实验额waisuo需wupin,(比如yiyeqi,shiguan,清洗qi,酶标仪)。

an说明书jiangsuo用shiji平衡zhishi温,gen据检测标本数量萬an╯uo需shiji的量。

检查shijihe内每种shiji的贮存条件,保证suo有shiji均an照shijihe内说明书推荐的条件存chu。

检查不稳定或者变质的shiji溶ye(比如沉淀或变色)。有些shiji,比如标准pinxi释ye或者检测xi释ye,keneng在设计时就含有沉淀wu。suo有shiji在滴入酶标板之前,必需充分混匀。eryou于沉淀wu的特性,在jia入酶标板之前,必需不停搅拌。

保证充分的孵yu时jianhe温度。

切wu使用不同生产批hao的shiji取代蟴hong衧hiji或混合蟴hong衧hiji。

在混合或溶解蛋白溶ye时,避mian泡沫产生。

在实验开始之前,安排好实验流程。

在实验开始之前,清洁gong作台。

若有问ti,应与我gong司或代li商的技术支硓hi袋/span>

gu丙转氨酶(ALT)shijihe结果判duan:

1. 每个标准pin的OD值减去空白kong的OD值hou作图,如设置复kong,则应取其平均值计算。yi标准pin的nong度wei横zuo标,OD值wei纵zuo标,绘chu标譲i摺R鄈eyiOD值wei横zuo标,标准pin的nong度wei纵zuo标,绘chu标譲i摺Ⅻ/span>

2. 推荐使用专业的曲线zhi作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既kegen据样pinOD值,you标譲i卟閏huxiang应的nong度,乘yixi释倍数ui鄈ejiang样pin的OD值代入标譲i叩膎i合fang程式,计算chu样pinnong度,再乘yixi释倍数,即wei样pin的实际nong度。

3. 若样pinOD值高于标譲i呱舷蓿κ实眡i释houzhong测,计算nong度时应乘yixi释倍数。 

gu丙转氨酶(ALT)shijihe有效qi稳定性考察

本shi验yigu丙转氨酶(ALT)wei例

1.  OD值:

正常保存条件下有效qi内he超过有效qi2个月suo测OD值比jiao

正常有效qi内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效qiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分bie于定值xue清jixue浆中jia入一定量的gu丙转氨酶(ALT)标准pin,zhong复测定bing计算其pin均值,回收率wei测定值与lilun值的比率。

        正常保存条件下有效qi内he过有效qi2个月elisa shijihe回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分bie于定值xue清jixue浆中jia入一定量的gu丙转氨酶(ALT)标准pin,bingjiang标本an1:2,1:4,1:8xi释,线性fan围即weixi释hou样本中gu丙转氨酶(ALT)含量的测定值与lilun值的比率。

         正常保存条件下有效qi内he过有效qi2个月elisa shijihe回线性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:yi样pin测定值的变异系数CV表shi。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批cishijihe对低值,中值he高值样本进行定量检测,每份样本测定20ci,分bie计算不同nong度样本的平均值heSD值。

批jian差:选取 3 个不同批ci的shijihe分bie对低、謝iao⒏咧刀ㄖ笛窘卸坎舛ǎ 每个样本使用同一shijihezhong复测定 8 ci,分bie计算不同nong度样本的平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存条件下有效qi内he过有效qi2个月elisa shijihe回精密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

gu丙转氨酶(ALT)shijihe会chu现的问tiji解决办法:

1. jia入反应终止yehou,没有吸光值或吸光值偏低。

a.yuan因:未jia入酶标jiwu。

解决办法:qingan照操作步骤进衳iaoⅫ/span>

b.yuan因:shijihe内容wu未neng充分回。

解决办法:萬an╯hijihe内容wu回温hou再进行操作。

c.yuan因:shi温太低。

解决办法:若shi温太低(<19),qing于操作步骤4,适当延长温yu时jian。

d.yuan因:未使用shijihe的清洗ye清洗。

解决办法: qing用shijihe内suo提供的清洗ye清洗。

e.yuan因:shijihe已过有效qi限。

解决办法:qing更huan成仍在有效qi限内的shijihe。

2. 标譲i呦咝圆患眩蚴瞧叫行圆缓谩Ⅻ/span>

a.yuan因:温yu位置避光不好或受dao气流干rao。

解决办法: qing确ren温yu位置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.yuan因:操作时jiantuo太jiu。

解决办法:qing在fang法熟练hou再进行操作。

c.yuan因:weikongjianxiang互污萰inⅫ/span>

解决办法: jia样pin时,qingxiao心wu溅chuweikongwai,yimian造成其它weikong的污萰inⅫ/span>

d.yuan因:标准pin或酶标jiwusuojia入的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法:qing使用已校正过的yiye枪,bing确保其与吸头之jian有高度密合性。

e.yuan因:tianjia样pin或shiji的操作fang法不正确。

解决办法:jia样pin或shiji时,吸头qingwu接触weikong。

f.yuan因:洗板过程发生问ti(如guan耭an氯⑾赐臧録ou未li刻进行下一步骤)

解决办法:qing随时监控洗板机洗板过程,洗完houli即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)

a.yuan因:shi温太高(>25)

解决办法: 若无法降低shi内温度,qing适当suo短步骤4的温yu时jian。

b.yuan因:diwu溶ye受dao污萰inⅫ/span>

解决办法: 若发现diwu溶ye已呈现淡lan色,qing瞙ui偈褂谩Ⅻ/span>

c.yuan因:反应时jian超过太jiu。

解决办法:qing控zhi反应时jian。

d.yuan因:酶标jiwu污染了he内其它shiji。

解决办法:使用过的吸头应li即丢弃,ke避mianshijijianxiang互污染,凡是shiji(特bie是酶标jiwu与diwu溶ye)接触过的容qi应li即清洗干净。(先yi漂白水浸泡,再yi清水chong洗干净,ke确保无残留)

4. 阴性标准pin的吸光值低于阳性标准pin的吸光值。

a.yuan因:weikong中的shiji未neng充分混簒iⅫ/span>

解决办法: shijijia完hou,需轻敲盘si周使其充分混合均匀。

b.yuan因:洗板过程发生问ti(2-f.)

解决办法:qing参考2-f.

c.yuan因:tianjia样pin或酶标jiwu的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法: qing参考2-d.