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人白jie素1受体II(IL-1R2)白jie素试剂盒

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bbin注册名称: 人白jie素1受体II(IL-1R2)白jie素试剂盒
bbin注册xing号: IL-1R2
bbin注册展商: ELISA试剂盒
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人白jie素1受体II(IL-1R2)白jie素试剂盒  的详细jie绍


白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒

使用说明书

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒基ben原理:

采用双bbin网址紉ing腅LISA法。用kang人IL-1R2bbin网址包被于meibiaoban上,实yan时样品或biao准品中的人IL-1R2与包被bbin网址jie合,游离的成分被洗qu。yi次加入生物素化的kang人IL-1R2bbin网址和la根过yang化物meibiao记的亲和素。kang人IL-1R2bbin网址与jie簒ian诎籦bin网址蓌i娜薎L-1R2jie簒i⑸锼赜肭缀退靥匾煨詊ie合而xing成**复合物,游离的成分被洗qu。加入xian色底物(TMB),TMB在la根过yang化物mei的cui化下呈现lan色,加终止液后变成huang色。用meibiao仪在450nm波长处测ODzhi,人IL-1R2浓du与OD450zhi之jian硈hou龋ü鎧hibiao准曲xian计算chu样品中人IL-1R2的浓秖uⅫ/span>

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒miao述:

英文名称 Human IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人白jie素1受体II(IL-1R2)mei联**吸fu测定试剂盒
huo号 X-EL-H0090c zhong属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方法 双bbin网址紉ing姆?/span>
jian测fan围 31.25~2000pg/mL 灵敏du 18.75pg/mL

人白jie素1受体II(IL-1R2)白jie素试剂盒组成:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

保存

  ELISAmeibiaoban(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻ganbiao准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

biao准品&样品xi释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbin网址xi释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRPmeijie合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

meijie合物xi释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物rong液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封ban覆mo

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注册说明书

Product  Description

  1 fen

 

质jian报告

Certificate of Analysis

  1 fen

 

人白jie素1受体II(IL-1R2)白jie素试剂盒特别说明
*: [96T/48T](打kai包装后请及时jian查所觴ing锲肥欠衿肴陑heng)
#: 一周na使用可存于4℃,需长时jian存放或多次使用建yi存于-20.                                      

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒jian测前准备工作:

1. 请ti前20穤hong哟颖渲衠uchu试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水xi释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中quchu的浓缩洗涤液可能有jie晶,属于正常现xiang,可用40℃水浴微加热使jie晶完全rong解后zaipeizhi洗涤液(加热温du不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。dang日使用。

3. biao准品10000×g离心1穤hong樱尤隻iao准品&样品xi释液1.0mL至冻ganbiao准品中,旋紧guangai,静置10穤hong樱舷碌叩故危琩ai其充分rong解后,用移液器将其轻轻混匀(浓du为8000pg/mL)。然后根据需要进xingbei比xi蕋ingㄗⅲ翰灰眏ie在反应孔中进xingbei比xi蕋ing=▂ipeizhi成以下浓du:按照xi释方法图li biao准品&样品xi释液直jie作为空白孔0ng/mL。如peizhi5ng/mLbiao准品:qu0.5mL10ng/mL的上述biao准品加入含有0.5mLbiao准品&样品xi释液的EPguan中,混匀ji可,其余浓duyici类tui。 

4. 生物素化bbin网址工作液:实yan前计算dang次实yan所需用量(以100μL/孔计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。使用前15穤hong樱陨锼鼗痓bin网址xi释液xi释浓缩生物素化bbin网址(1:100)成工作浓秖uang日使用。

5. meijie合物工作液:实yan前计算dang次实yan所需用量(以100μL/孔计),实际peizhi时应多peizhi100-200μL。使用前15穤hong樱詍eijie合物xi释液xi释浓缩HRPmeijie合物(1:100)成工作浓秖uⅫ/span>

dang日使用。

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒biao准品xi释方法图li:(以500μL/guan为li,也可根据实际用量来xi蕋ing纥/span>200μL/guan)

            

1. 在各孔中加入biao准品或样品各100μL 37℃孵育90穤hong尹/span>

2. 加入100μ生物素化bbin网址工作液,37℃孵育60穤hong尹/span>

3. 洗涤3

4. 加入100μLmeijie合物工作液, 37℃孵育30穤hong尹/span>

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物rong液, 37℃孵育15穤hong幼笥腰/span>

7. 加入50μL终止液,立ji在450nm波长处测量ODzhi

8. jie果计算

一、cao作因素duiELISAjie果的影xiangELISAcao作bu骤复杂,cao作不dang将引起较大的wu差。以下xu述各个bu骤中的影xiang因素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.xian色

5.比色

二、灰区的she置通常情况下,ELISA定性实yan以“阳性”和“阴性”来报告jie果,两者jian有一条分界xian被称为“阳性舩ie蟴hi”(cut-off valueCOzhi),这是定性**测定jie果报告的yi据。

san、biaoben复查ELISA手工jian测过程复杂,影xiang因素较多,ji使室na质控在控,也可能因孔jian差异而zao成jie果的差异,因ci加大复查力du是保证jie果准que性的可靠方法,比如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Abdeng项目的可疑、弱阳衴uan阞en及少见模shi的jian测jie果进xing复查。

四、jie果舩ie虾捅ǜ娉S孟铝屑竮hong方法表示jie果:

1.定性测定

2.半定量测定 jie果一般以滴du表示。

3.定量测定 ji用已知量的biao准品作一xi列xi释后进xingELISA测定,绘zhibiao准曲xian,jie果以优良量或单位表示。在ELISA定量jian测中每一块反应ban都bi须绘zhi相应的biao准曲xian。

白jie素试剂盒注yishi项:

仔细阅du说明书。

jian查试剂盒biao签蓌i挠xing凇H绻xing冢雡u使用。

癱i得魇閝ue定所有试剂齐全(数量、体积)。

biaobenzhi备要规fan,每fenbiaoben体积要按2-3个复孔以蓌i牧縵hi备(贮存),尽量分装zuo备fen。短期nawu法实yan者,注yi低温保存。

准备好所有实yan额外所需物品,(比如移液器,试guan,清洗器,meibiao仪)。

癱i得魇榻檬约疗胶庵潦椅拢輏ian测biaoben数量que定所需试剂的量。

jian查试剂盒na每zhong试剂的贮存条件,保证所有试剂jun按照试剂盒na说明书tuijian的条件存储。

jian查不稳定或者变质的试剂rong液(比如沉淀或变色)。觴ing┦约粒热鏱iao准品xi释液或者jian测xi释液,可能在she计蔮en秃谐恋砦铩K惺约猎诘稳雖eibiaoban之前,bi需充分混詑u6捎诔恋砦锏奶匦裕诩尤雖eibiaoban之前,bi需不ting搅拌。

保证充穤hi姆跤眏ian和温秖uⅫ/span>

切wu使用不同生chan批号的试剂qu代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或rong解蛋白rong液时,避mian泡沫chan生。

在实yankai始之前,安排好实yan流程。

在实yankai始之前,清洁工作台。

若觴ing侍猓τ胛夜净虼砩痰募际踔С至獂i

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒jie果舩ie吸/span>:

1. 每个biao准品的ODzhi减qu空白孔的ODzhi后作图,如she謒ei纯祝蛴u其平junzhi计算。襶uan曜计返呐╠u为横坐biao,ODzhi为纵坐biao,绘chubiao准曲xian。亦可以ODzhi为横坐biao,biao准品的浓du为纵坐biao,绘chubiao准曲xian。

2. tuijian使用专业的曲xianzhi作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根据样品ODzhi,由biao准曲xian查chu相应的浓du,乘以xi释bei数;亦可将样品的ODzhi代入biao准曲xian的拟合方程shi,计算chu样品浓du,zai乘以xi释bei数,ji为样品的实际浓秖uⅫ/span>

3. 若样品ODzhi高于biao准曲xian上限,应适dangxi释后重测,计算浓du时应乘以xi释bei数。 

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒觴ing谖榷ㄐ钥疾朦/span>

ben试yan以白jie素1受体II(IL-1R2)为li

1.  ODzhi:

正常保存条件下觴ing趎a和超过觴ing冱span>2个yue所测OD謉ang冉吸/span>

正常觴ing趎aODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个yue觴ing冱/span>ODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shou率:分别于定zhi血清及血浆中加入一定量的白jie素1受体II(IL-1R2)biao准品,重复测定并计算其品junzhi,回shou率为测定zhi与理论zhi的比率。

        正常保存条件下觴ing趎a和过觴ing冱span>2个yueelisa 试剂盒回shou率jian测jie果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xian性:分别于定zhi血清及血浆中加入一定量的白jie素1受体II(IL-1R2)biao准品,并将biaoben按1:2,1:4,1:8xi蕋ing瑇ian性fan围ji为xi释后样ben中白jie素1受体II(IL-1R2)含量的测定zhi与理论zhi的比率。

         正常保存条件下觴ing趎a和过觴ing冱span>2个yueelisa 试剂盒回xian性jian测jie果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密du:以样品测定zhi的变异xi数CV表示。CV%=SD/meanx100

批na差:qu同一批次试剂簒ie缘蛕hi,中zhi和高zhi样ben进衳ie縥ian测,每fen样ben测定20次,分别计算不同浓du样ben的平junzhi和SDzhi。

批jian差:选qu 3 个不同批次的试剂盒分别dui低、中、高zhi定zhi样ben进衳ie坎舛ǎ 每个样ben使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不同浓du样ben的平junzhi及 SD zhi。(批na差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存条件下觴ing趎a和过觴ing冱span>2个yueelisa 试剂盒回精密dujian测jie果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

白jie素1受体II(IL-1R2)试剂盒会chu蟴hi奈侍饧敖饩霭旆ǎ裹/span>

1. 加入反应终止液后,mei觴ing鈠hi或吸光zhipian低。

a.原因:未加入meibiao记物。

解决办法:请按照cao作bu骤进xing。

b.原因:试剂盒na容物未能充分回。

解决办法:que定试剂盒na容物回温后zai进xingcao作。

c.原因:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19),请于cao作bu骤4,适dang延长温育时jian。

d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。

解决办法: 请用试剂盒na所ti供的清洗液清洗。

e.原因:试剂盒已过觴ing谙蕖Ⅻ/span>

解决办法:请geng换成仍在觴ing谙辬a的试剂盒。

2. biao准曲xianxian性不jia,或是平xing性不好。

a.原因:温育位置避光不簃ei蚴艿絨i流gan扰。

解决办法: 请que认温育位置既不透光也不透风(如抽屉na)

b.原因:cao作时jian拖太久。

解决办法:请在方法熟lian后zai进xingcao作。

c.原因:微孔jian相互污ran。

解决办法: 加样品时,请小心wu溅chu微孔外,以mianzao成其它微孔的污ran。

d.原因:biao准品或meibiao记物所加入的量不一zhi。

解决办法:请使用已校正过的移液qiang,并que保其与吸头之jian有高du密合性。

e.原因:tian加样品或试剂的cao作方法不正que。

解决办法:加样品或试剂时,吸头请wujie触微孔。

f.原因:洗ban过程fa生问题(如guan耭an氯⑾赐阞an后未立ke进xing下一bu骤)

解决办法:请随时监控洗ban机洗ban过程,洗完后立ji进xing下一bu骤。

3. 吸光zhijunpian高(或xian性不够陡)

a.原因:室温太高(>25)

解决办法: 若wu法降低室na温du,请适dang缩短bu骤4的温育时jian。

b.原因:底物rong液受到污ran。

解决办法: 若fa蟴hi孜飏ong液已呈蟴hi璴an色,请不要zai使用。

c.原因:反应时jian超过太久。

解决办法:请控zhi反应时jian。

d.原因:meibiao记物污ran了盒na其它试剂。

解决办法:使用过的吸头应立ji丢qi,可避mian试剂jian相互污ran,凡是试剂(特别是meibiao记物与底物rong液)jie触过的容器应立ji清洗gan净。(先以piao白水浸泡,zai以清水冲洗gan净,可que保wucan留)

4. 阴衴uan曜计返奈鈠hi低于阳衴uan曜计返奈鈠hi。

a.原因:微孔中的试剂未能充分混簒iⅫ/span>

解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分混合jun詑uⅫ/span>

b.原因:洗ban过程fa生问题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:tian加样品或meibiao记物的量不一zhi。

解决办法: 请参考2-d.

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