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人抗miao勒管**(AMH)试ji盒

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bbin注册名称: 人抗miao勒管**(AMH)试ji盒
bbin注册型号: AMH
bbin注册展商: ELISA试ji盒
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简单介绍

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人抗miao勒管**(AMH)试ji盒  de详细介绍


抗miao勒管**(AMH)试ji盒

使用shuo明书

抗miao勒管**(AMH)试ji盒基本原理:

本试ji盒采用shuangbbin网址jia心ELISA法。用抗人AMHbbin网址包被于酶标板上,实yan时样品huo标准品中de人AMH与包被bbin网址结he,游lidecheng分被洗qu。依次加ru生wu素化de抗人AMHbbin网址he辣根过氧化wu酶标记deqinhe素。抗人AMHbbin网址与结he在包被bbin网址上de人AMH结he、生wu素与qinhe素特异性结he而形cheng**复hewu,游lidecheng分被洗qu。加ru显色底wu(TMB),TMB在辣根过氧化wu酶de催化下呈现蓝色,加终止液后biancheng黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人AMH浓度与OD450值之jian呈正比,tong过绘zhi标准曲线计算出样品中人AMHde浓度。

抗miao勒管**(AMH)试ji盒描述:

英文名称 Human AMH (Anti-Mullerian Hormone) ELISA Kit
中文名称 人抗miao勒管**(AMH)酶联**吸附测定试ji盒
货号 X-EL-H0317c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 shuangbbin网址jia心法
检测范wei 93.75~6000pg/mL 灵敏度 56.25pg/mL

试ji盒组cheng:

中文名称

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生wu素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化bbin网址稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结hewu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避guang)

酶结hewu稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底wu溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避guang)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

bbin注册shuo明书

Product  Description

  1 fen

 

质检bao告

Certificate of Analysis

  1 fen

 

特bieshuo明
*: [96T/48T](打开包装后请ji时检cha所有wu品是否qi全wan整)
#: 一zhou内使用可存于4℃,xu长时jian存fanghuo多磜en褂媒ㄒ榇嬗冱/span>-20.                                      

抗miao勒管**(AMH)试ji盒检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试ji簒iao胶庵潦椅longⅫ/span>

2. 将浓缩洗涤液用shuang蒸水稀释(1:25)。wei用wandefanghui4℃。从冰箱中取出de浓缩洗涤液可neng有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加re使结晶wan全溶解后再配zhi洗涤液(加re温度不yao超过50℃,使用时洗涤液应wei室温)。当日使用。

3. 标准品10000×gli心1分钟,加ru标准品&样品稀释液1.0mL至冻干标准品謝iao齤in管盖,jing置10分钟,上下颠daoshu次,daiqi充分溶解后,用移液器将qi轻轻混yun(浓度wei8000pg/mL)。然后根juxuyaojin行倍比稀释(注:不yao直jie在反应孔中jin行倍比稀释)。建议配zhicheng以下浓度:an照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直jie作wei空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mLde上述标准品加ru含有0.5mL标准品&样品稀释液deEP管謝iao靬un即可,qi余浓度依cilei推。 

4. 生wu素化bbin网址工作液:实yan前计算当磜en祔an所xu用量(以100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以生wu素化bbin网址稀释襤e∈团ㄋ跎鷚u素化bbin网址(1:100)cheng工作浓度。当日使用。

5. 酶结hewu工作液:实yan前计算当磜en祔an所xu用量(以100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以酶结hewu稀释襤e∈团ㄋ酎/span>HRP酶结hewu(1:100)cheng工作浓度。

当日使用。

抗miao勒管**(AMH)试ji盒标准品稀释方法图例:(以500μL/管wei例,也可根ju实际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加ru标准品huo样品各100μL 37℃孵yu90分钟

2. 加ru100μ生wu素化bbin网址工作液,37℃孵yu60分钟

3. 洗涤3

4. 加ru100μL酶结hewu工作液, 37℃孵yu30分钟

5. 洗涤5

6. 加ru90μL底wu溶液, 37℃孵yu15分钟左右

7. 加ru50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD

8. 结果计算

一、操作yin素对ELISA结果de影响ELISA操作buzhou复杂,操作不当将引起较大dewu差。以下叙述各个buzhou中de影响yin素。

1.加样

2.温yu

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰qudeshe置tong常情况下,ELISA定性实yan以“阳性”he“yin性”来bao告结果,两zhejian有一条分jie线被称wei“阳性判断值”(cut-off valueCO值),zhe是定性**测定结果bao告de依ju。

三、标本复chaELISA手工检测过程复杂,影响yin素较多,即使室内质kong在kong,也可nengyin孔jian差异而造cheng结果de差异,yinci加大复cha力度是保zheng结果准确性de可kao方法,眗e缍狱/span>HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Abdeng项mude可yi、弱阳性标本ji少见模shide检测结果jin行复cha。

四、结果判断hebao告常用下列几种方法表示结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般以滴度表示。

3.定量测定 即用yi知量de标准品作一xi列稀释后jin行ELISA测定,绘zhi标准曲线,结果以优羓i縣uo单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板du必须绘zhi相应de标准曲线。

注意事项:

仔细yue读shuo明书。

检cha试ji盒标签上de有效期。如果超过有效期,请勿使用。

癱i得魇槿范ㄋ惺詊iqi全(shu量、体ji)。

标本zhi备yao规范,每fen标本体jiyaoan2-3个复孔以上de量zhi备(zhu存),尽量分装做备fen。短期内无法实yanzhe,注意di温保存。

准备好所有实yan额wai所xuwu品,(眗e缫埔浩鳎怨埽逑雌鳎副暌牵Ⅻ/span>

癱i得魇榻檬詊i平衡至室温,根ju检测标本shu量确定所xu试jide量。

检cha试ji盒内每种试jidezhu存条件,保zheng所有试ji均an照试ji盒内shuo明书推荐de条件存chu。

检cha不稳定huozhebian质de试ji溶液(眗e鏲hen淀huobian色)。有些试ji,眗e绫曜计废∈鸵篽uozhe检测稀释液,可neng在she计时jiu含有chen淀wu。所有试ji在滴ru酶标板之前,必xu充分混yun。而由于chen淀wude特性,在加ru酶标板之前,必xu不停搅拌。

保zheng充分de孵yu时jianhe温度。

切勿使用不tong生产批号de试ji取代现有试jihuo混he现有试ji。

在混hehuo溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。

在实yan开始之前,安排好实yan流程。

在实yan开始之前,清洁工作台。

若有wen题,应与我公司huo代理商de技术支持联xi

抗miao勒管**(AMH)试ji盒结果判断:

1. 每个标准品deOD值减qu空白孔deOD值后作图,如she置复孔,则应取qi平均值计算。以标准品de浓度weiheng坐标,OD值wei纵坐标,绘出标准曲线。亦可以OD值weiheng坐标,标准品de浓度wei纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业de曲线zhi作软件,如curve expert 1.3huo1.4,在软件jie面既可根ju样品OD值,由标准曲线cha出相应de浓度,乘以稀释倍shu;亦可将样品deOD值代ru标准曲线de拟he方程shi,计算出样苀angǘ龋俪艘韵∈捅秙hu,即wei样品de实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲线上xian,应shi当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍shu。 

抗miao勒管**(AMH)试ji盒有效期稳定性考察

本试yan以抗miao勒管**(AMH)wei例

1.  OD值:

正常保存条件下有效期内he超过有效期2个月所测OD值比较

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.hui收lv:分bie于定值血清ji血浆中加ru一定量de抗miao勒管**(AMH)标准品,重复测定并计算qi品均值,hui收lvwei测定值与理论值de比lv。

        正常保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试ji盒hui收lv检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分bie于定值血清ji血浆中加ru一定量de抗miao勒管**(AMH)标准品,并将标本an1:2,1:4,1:8稀释,线性范wei即wei稀释后样本中抗miao勒管**(AMH)含量de测定值与理论值de比lv。

         正常保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试ji盒hui线性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  jing密度:以样品测定值debian异xishuCV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取tong一批磜en詊i盒对di值,中值he高值样本jin行定量检测,每fen样眏ing舛?span>20次,分bie计算不tong浓度样本de平均值heSD值。

批jian差:选取 3 个不tong批次de试ji盒分bie对di、謝iao⒏咧刀ㄖ笛緅in行定量测定, 每个样本使用tong一试ji盒重复测定 8 次,分bie计算不tong浓度样本de平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试ji盒huijing密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

抗miao勒管**(AMH)试ji盒hui出现dewen题ji解jueban法:

1. 加ru反应终止液后,没有吸guang值huo吸guang值偏di。

a.原yin:wei加ru酶标记wu。

解jueban法:请an照操作buzhoujin衳iaoⅫ/span>

b.原yin:试ji盒内容wuweineng充分hui。

解jueban法:确定试ji盒内容wuhui温后再jin行操作。

c.原yin:室温taidi。

解jueban法:若室温taidi(<19),请于操作buzhou4,shi当延长温yu时jian。

d.原yin:wei使用试ji盒de清洗液清洗。

解jueban法: 请用试ji盒内所提供de清洗液清洗。

e.原yin:试ji盒yi过有效期xian。

解jueban法:请更换cheng仍在有效期xian内de试ji簒iaoⅫ/span>

2. 标准曲线线性不佳,huo是平行性不好。

a.原yin:温yu位置避guang不好huo受到气流干扰。

解jueban法: 请确认温yu位置既不透guang也不透风(如抽屉内)

b.原yin:操作时jiantuotaijiu。

解jueban法:请在方法熟lian后再jin行操作。

c.原yin:微孔jian相hu污ran。

解jueban法: 加样品时,请xiao心勿jian出微孔wai,以免造chengqi它微孔de污ran。

d.原yin:标准品huo酶标记wu所加rude量不一謑ongⅫ/span>

解jueban法:请使用yixiao正过de移液qiang,并确保qi与吸头之jian有高度密he性。

e.原yin:tian加样品huo试jide操作方法不正确。

解jueban法:加样品huo试ji时,吸头请勿jie触微孔。

f.原yine窗骞谭⑸鷚en题(如管路堵塞、洗wan板后wei立刻jin行下一buzhou)

解jueban法:请随时监kong洗板机洗板过程,洗wan后立即jin行下一buzhou。

3. 吸guang值均偏高(huo线性不goudou)

a.原yin:室温tai高(>25)

解jueban法: 若无法降di室内温度,请shi当缩短buzhou4de温yu时jian。

b.原yin:底wu溶液受到污ran。

解jueban法: 若发现底wu溶液yi呈现淡蓝色,请不yao再使用。

c.原yin:反应时jian超过taijiu。

解jueban法:请kongzhi反应时jian。

d.原yin:酶标记wu污ran了盒内qi它试ji。

解jueban法:使用过de吸头应立即丢弃,可避免试jijian相hu污ran,凡是试ji(特bie是酶标记wu与底wu溶液)jie触过de容器应立即清洗干净。(xian以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. yin性标准品de吸guang值di于阳性标准品de吸guang值。

a.原yin:微孔中de试jiweineng充分混he。

解jueban法: 试ji加wan后,xu轻敲盘四zhou使qi充分混he均yun。

b.原yine窗骞谭⑸鷚en题(tong2-f.)

解jueban法:请参考2-f.

c.原yin:tian加样品huo酶标记wude量不一謑ongⅫ/span>

解jueban法: 请参考2-d.

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