bbinzhu册资liao

人嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒

如果您对该bbinzhu册竫ing巳さ幕?可以
bbinzhu册名称: 人嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒
bbinzhu册型号: CHGB
bbinzhu册展商: ELISA试剂盒
bbinzhu册文档: 无相guan文档

简单jie绍

黄金城


人嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒  的详细jie绍


嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒

使yong说明书

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒基benyuan理:

ben试剂盒caiyongshuangbbin网址紉ing腅LISA法。yong抗人CHGBbbin网址包被yu酶标板上,实验时样品或标准品中的人CHGB与包被bbin网址结合,游离的成分被洗去。依ci加入sheng物素化的抗人CHGBbbin网址和纀ei趸锩副昙堑膓in和素。抗人CHGBbbin网址与结合在包被bbin网址上的人CHGB结合、sheng物素与qin和素特异性结合erxing成**fu合物,游离的成分被洗去。加入显se底物(TMB),TMB在纀ei趸锩傅拇呋鲁氏掷秙e,加终止液后变成黄se。yong酶标yi在450nm波chang处ceOD值,人CHGB浓度与OD450值zhi间呈zheng比,通过绘制标准曲xian计算chu样品中人CHGB的浓度。

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒描述:

英文名称 Human CHGB (Chromogranin B) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人嗜铬蛋baiB(CHGB)酶联**吸fuce定试剂盒
货号 X-EL-H0832c zhongshu Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方法 shuangbbin网址紉ing姆?/span>
检ce范围 62.5~4000pg/mL 灵敏度 37.5pg/mL

试剂盒组成:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

保cun

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1ping 20mL/12mL*

4

浓suosheng物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化bbin网址稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓suoHRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避光)

胒u岷衔锵∈鸵裹/span>

HRP Conjugate Diluent

  1ping 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1ping 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1ping 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止液

Stop Solution

  1ping 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbinzhu册说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特bie说明
*: [96T/48T](打开包装后qing及时检查所觴ing锲肥欠衿肴暾?/span>
#: 一周内使yong可cunyu4℃,需chang时间cun放或duoci使yongjian议cunyu-20.                                      

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒检ce莃ai糱ei工作:

1. qingti前20穤hong哟颖渲腥hu试剂盒,ping衡至室温。

2. 将浓suo洗涤液yongshuang蒸水稀释(1:25)。未yong完的放回4℃。从冰箱中取chu的浓suo洗涤液可neng有结晶,shuyuzheng常现象,可yong40℃水yuwei加re使结晶完全溶解后再配制洗涤液(加re温度不要超过50℃,使yong时洗涤液应为室温)。当日使yong。

3. 标准品yu10000×g离心1穤hong樱尤氡曜计饵/span>&样品稀释液1.0mL至冻干标准品中,xuan紧管盖,静置10穤hong樱舷碌叩故齝i,待其充分溶解后,yong移液器将其轻轻hun匀(浓度为8000pg/mL)。ran后根据需要进xingbei比稀蕋ing▃hu:不要直jie在反应孔中进xingbei比稀蕋ingian议配制成以下浓度:按照稀释方法图li 标准品&样品稀释液直jie作为空bai孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入han有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,hun匀即可,其余浓度依此类推。 

4. sheng物素化bbin网址工作液:实验前计算当ci实验所需yong量(以100μL/孔计),实际配制时应duo配制100-200μL。使yong前15穤hong樱詓heng物素化bbin网址稀释液稀释浓suosheng物素化bbin网址(1:100)成工作浓度。当日使yong。

5. 胒u岷衔锕ぷ饕海菏笛榍凹扑愕眂i实验所需yong量(以100μL/孔计),实际配制时应duo配制100-200μL。使yong前15穤hong樱悦fu岷衔锵∈鸵合∈团╯uoHRP胒u岷衔铧/span>(1:100)成工作浓度。

当日使yong。

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒标准品稀释方法图li:(以500μL/管为li,ye可根据实际yong量来稀蕋ing纥/span>200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL 37℃孵yu90穤hong尹/span>

2. 加入100μsheng物素化bbin网址工作液,37℃孵yu60穤hong尹/span>

3. 洗涤3ci

4. 加入100μL胒u岷衔锕ぷ饕海?/span> 37℃孵yu30穤hong尹/span>

5. 洗涤5ci

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵yu15穤hong觶uo右

7. 加入50μL终止液,立即在450nm波chang处ce量OD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的影响ELISA操作步zhoufuza,操作不当将引qi较大的误差。以下叙述各个步zhou中的影响因素。

1.加样

2.温yu

3.洗涤

4.显se

5.比se

er、粂i纳柚猛ǔG榭鱿拢?/span>ELISA定性实验襶u把粜yu焙汀耙跣yu崩幢ǜ娼峁秸呒溆幸籺iao分jiexian被称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**ce定结果报告的依据。

三、标benfu查ELISA手工检ce过程fuza,影响因素较duo,即使室内质kong在kong,ye可neng因孔间差异er造成结果的差异,因此加大fu查力度是保证结果譲i沸缘目煽糠椒ǎre缍狱/span>HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可疑、弱阳性标ben及少见mo式的检ce结果进xingfu查。

四、结果判断和报告常yong下lie几zhong方法表示结果:

1.定性ce定

2.半定量ce定 结果一般以di度表示。

3.定量ce定 即yong已知量的标准品作一系lie稀释后进xingELISAce定,绘制标准曲xian,结果襷a帕剂炕虻ノ槐硎尽T冱/span>ELISA定量检ce中每一块反应板du必xu绘制相应的标准曲xian。

zhuyi事xiang:

仔细阅读说明书。

检查试剂盒标qian上的觴ing凇H绻xing冢琿ing勿使yong。

按说明书que定所有试剂齐全(数量、体积)。

标ben制bei要规范,每份标ben体积要按2-3个fu孔以上的量制bei(贮cun),尽量穤hongbai鯾ei份。短期内无法实验者,zhuyidi温保cun。

准beihao所有实验额外所需物品,(眗e缫埔浩鳎怨埽逑雌鳎副陏i)。

按说明书将所yong试剂ping衡至室温,根据检ce标ben数量que定所需试剂的量。

检查试剂盒内每zhong试剂的贮cuntiao件,保证所有试剂均按照试剂盒内说明书推荐的tiao件cun储。

检查不稳定或者变质的试剂溶液(眗e鏲hen淀或变se)。觴ing┦约粒re绫曜计废∈鸵夯蛘呒靋e稀释液,可neng在设计蔮en蚳an有chen淀物。所有试剂在di入酶标板zhi前,必需充分hun匀。er由yuchen淀物的特性,在加入酶标板zhi前,必需不tingjiao拌。

保证充分的孵yu时间和温度。

莤ing鹗箉ong不同shengchan批号的试剂取代蟴hong惺约粱騢un合蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

在hun合或溶解蛋bai溶液时,避免pao沫chansheng。

在实验开始zhi前,安排hao实验liu程。

在实验开始zhi前,清洁工作tai。

若有wen题,应与wo公薺ing虼砩痰募际鮶hichi联系

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒结果判断:

1. 每个标准品的OD值减去空bai孔的OD值后作图,如设置fu孔,则应取其ping均值计算。以标准品的浓度为横坐标,OD謉i葑辏鎐hu标准曲xian。亦可以OD謉i嶙辏曜计返呐ǘ任葑辏鎐hu标准曲xian。

2. 推荐使yongzhuanye的曲xian制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件jiemianji可根据样品OD值,由标准曲xian查chu相应的浓度,乘以稀释bei数;亦可将样品的OD值代入标准曲xian的ni合方程式,计算chu样品浓度,再乘以稀释bei数,糲i返氖导逝ǘ取Ⅻ/span>

3. 若样品OD值高yu标准曲xian上xian,应适当稀释后重ce,计算浓度时应乘以稀释bei数。 

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒觴ing谖榷ㄐ钥疾朦/span>

ben试验以嗜铬蛋baiB(CHGB)为li

1.  OD值:

zheng常保cuntiao件下觴ing谀诤统xing冱span>2个月所ceOD值比较

zheng常觴ing谀冱span>OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月觴ing冱/span>OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shou率:分bieyu定值血清及血浆中加入襤uan康命/span>嗜铬蛋baiB(CHGB)标准品,重fuce定并计算其品均值,回shou率为ce定值与理论值的比率。

        zheng常保cuntiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回shou率检ce结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xian性:分bieyu定值血清及血浆中加入襤uan康命/span>嗜铬蛋baiB(CHGB)标准品,并将标ben按1:2,1:4,1:8稀蕋ing瑇ian性范围糲i∈秃笱鵥en中嗜铬蛋baiB(CHGB)han量的ce定值与理论值的比率。

         zheng常保cuntiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回xian性检ce结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样品ce定值的变异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批ci试剂盒对di值,中值和高值样ben进xing定量检ce,每份样bence定20ci,分bie计算不同浓度样ben的ping均值和SD值。

批间差:选取 3 个不同批ci的试剂盒分bie对di、謝iao⒏咧刀ㄖ笛鵥en进xing定量ce定, 每个样ben使yong同一试剂盒重fuce定 8 ci,分bie计算不同浓度样ben的ping均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       zheng常保cuntiao件下觴ing谀诤凸xing冱span>2个月elisa 试剂盒回精密度检ce结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

嗜铬蛋baiB(CHGB)试剂盒会chu现的wen题及解决办法:

1. 加入反应终止液后,没觴ing庵祷蛭庵灯玠i。

a.yuan因:未加入酶标记物。

解决办法:qing按照操作步zhou进xing。

b.yuan因:试剂盒内容物未neng充分回。

解决办法:que定试剂盒内容物回温后再进xing操作。

c.yuan因:室温太di。

解决办法:若室温太di(<19),qingyu操作步zhou4,适当延chang温yu时间。

d.yuan因:未使yong试剂盒的清洗液清洗。

解决办法: qingyong试剂盒内所tigong的清洗液清洗。

e.yuan因:试剂盒已过觴ing趚ian。

解决办法:qinggeng换成仍在觴ing趚ian内的试剂簒iaoⅫ/span>

2. 标准曲xianxian性不佳,或是pingxing性不hao。

a.yuan因:温yu位置避光不hao或受到气liu干扰。

解决办法: qingque认温yu位置ji不透光ye不透风(如抽屉内)

b.yuan因:操作时间拖太jiu。

解决办法:qing在方法shu练后再进xing操作。

c.yuan因:wei孔间相hu污ran。

解决办法: 加样品时,qingxiao心勿溅chuwei孔外,以免造成其它wei孔的污ran。

d.yuan因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法:qing使yong已校zheng过的移液枪,并que保其与吸头zhi间有高度密合衴uⅫ/span>

e.yuan因:添加样品或试剂的操作方法不zhengque。

解决办法:加样品或试剂时,吸头qing勿jie触wei孔。

f.yuan因:洗板过程发shengwen题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进xing下一步zhou)

解决办法:qing随时监kong洗板机洗板过程,洗完后立即进xing下一步zhou。

3. 吸光值均偏高(或xian性不gou陡)

a.yuan因:室温太高(>25)

解决办法: 若无法降di室内温度,qing适当suo短步zhou4的温yu时间。

b.yuan因:底物溶液受到污ran。

解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝se,qing不要再使yong。

c.yuan因:反应时间超过太jiu。

解决办法:qingkong制反应时间。

d.yuan因ao副昙俏镂踨an了盒内其它试剂。

解决办法:使yong过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相hu污ran,凡是试剂(特bie是酶标记物与底物溶液)jie触过的容器应立即清洗干jing。(先以漂bai水浸pao,再以清水冲洗干jing,可que保无残留)

4. 阴性标准品的吸光值diyu阳性标准品的吸光值。

a.yuan因:wei孔中的试剂未neng充分hun合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲盘四周使其充分hun合均匀。

b.yuan因:洗板过程发shengwen题(2-f.)

解决办法:qing参考2-f.

c.yuan因:添加样品或酶标记物的量不一致。

解决办法: qing参考2-d.

bbinzhu册留言
标题
联系人
联系电话
内容
验证码
点ji换一张
zhu:1.可以使yongkuai捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,qing您留下您的详细联系方式!