bbin注册资料

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒

如果您对gaibbin注册gan兴qu的话,可以
bbin注册名称: ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒
bbin注册型号: MCSF
bbin注册展商: ELISA试剂盒
bbin注册文档: 无相guan文档

简dan介绍

bt365体育在线投注


ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒  的详细介绍


ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒

使用shuoming书

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒基本原理:

本试剂盒cai用双bbin网zhi夹心ELISA法。用抗renMCSFbbin网zhi包被于酶标板上,实yan时样品或标准品中的renMCSF与包被bbin网zhi结合,游离的成分被xi去。依次加入生物素化的抗renMCSFbbin网zhi和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗renMCSFbbin网zhi与结合在包被bbin网zhi上的renMCSF结合、生物素与亲和素特yixing结合而形成**fu合物,游离的成分被xi去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下cheng现蓝色,加终zhi液后变成黄色。用酶标仪在450nmbo长处测OD值,renMCSF浓du与OD450值之间cheng正比,tong过绘制标准qu线计算出样品中renMCSF的浓du。

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒描述:

英文名称 Human MCSF (Macrophage Colony Stimulating Factor 1) ELISA Kit
中文名称 ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)酶联**吸附测定试剂盒
huo号 X-EL-H0097c 种属 Human/ren
规ge 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双bbin网zhi夹心法
检测范围 31.25~2000pg/mL ling敏du 18.75pg/mL

试剂盒组成:

中文名称

英文名称

规ge

保cun

  ELISA酶标板(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化bbin网zhi

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbin网zhi稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩xi祔ou海?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终zhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板竎ai|/span>

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

bbin注册shuoming书

Product  Description

  1 

 

謘hi毂ǜ妩/span>

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuoming
*: [96T/48T](da开包装后请及时检查所有物品是否齐全wan整)
#: 一zhou内使用可cun于4℃,需长时间cun放或多磜en褂媒ㄒ閏un于-20.                                      

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒检测莃ai急腹ぷ鳇/span>:

1. 请提前20分钟从bing箱中取出试剂盒,平衡至shi温。

2. 将浓缩xi祔ou河盟珃heng水稀释(1:25)。未用wan的放回4℃。从bing箱中取出的浓缩xi祔ou嚎赡苡薪峋В粲谡O窒螅捎曼/span>40℃水浴微加热使结晶wan全溶解后再配制xi祔ou海尤任耫u不yao超过50℃,使用时xi祔ou河ξ猻hi温)。当日使用。

3. 标准品10000×g离心1分钟,加入标准品&样品稀释液1.0mL至冻gan标准品中,旋紧管盖,jing置10分钟,上下颠倒shu次,待其充分溶解后,用移液器将其qingqing混yun(浓du为8000pg/mL)。然后根据需yao进行倍比稀释(注:不yao直jie在反应孔中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓du:按照稀蕋ou椒╰uli 标准品&样品稀释液直jie作为空bai孔0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管中,混yun即可,其余浓du依此leitui。 

4. 生物素化bbin网zhi工作液:实yan前计算当磜en祔an所需用量(以100μL/孔计),实ji配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以生物素化bbin网zhi稀释液稀释浓缩生物素化bbin网zhi(1:100)成工作浓du。当日使用。

5. 酶结合物工作液:实yan前计算当磜en祔an所需用量(以100μL/孔计),实ji配制时应多配制100-200μL。使用前15分钟,以酶结合物稀释液稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓du。

当日使用。

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒标准品稀蕋ou椒╰uli:(以500μL/管为li,也可根据实ji用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在ge孔中加入标准品或样品ge100μL 37℃fuyu90分钟

2. 加入100μ生物素化bbin网zhi工作液,37℃fuyu60分钟

3. xi涤3

4. 加入100μL酶结合物工作液, 37℃fuyu30分钟

5. xi涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃fuyu15分钟左you

7. 加入50μL终zhi液,立即在450nmbo长处测量OD

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的ying响ELISA操作bu骤fuza,操作不当将引起jiao大的误差。以下叙述ge个bu骤中的ying响因素。

1.加样

2.温yu

3.xi涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置tong常情况下,ELISA定xing实yan以“yangxing”和“yinxing”来报告结果,两者间有一条分界线被称为“yangxing舩ie现怠保?/span>cut-off valueCO值),这是定xing**测定结果报告的依据。

san、标本fu查ELISA蕑hiぜ觳夤蘤uza,ying响因素jiao多,即使shi内质控在控,也可能因孔间差yi而造成结果的差yi,因此加大fu查lidu是保证结果准quexing的可靠方法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Abdengxiang目的可疑、ruoyangxing标本及shao见模蔶iang募觳饨峁衒u查。

四、结果舩ie虾捅ǜ娉S孟铝屑钢zhi椒ū硎窘峁裹/span>

1.定xing测定

2.半定量测定 结果一般以滴du表示。

3.定量测定 即用yi知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标准qu线,结果襷a舕iang量或dan位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都bi须绘制相应的标准qu线。

注意shixiang:

zi细阅dushuoming书。

检查试剂盒标qian上的有效qi。如果超过有效qi,请勿使用。

按shuoming书que定所有试剂齐全(shu量、体积)。

标本制备yao规范,每份标本体积yao按2-3个fu孔以上的量制备(贮cun),尽量分装zuo备份。短qi内无法实yan者,注意di温保cun。

准备好所有实yan额外所需物品,(比如移液器,试管,清xi器,酶标仪)。

按shuoming书将所用试剂平衡至shi温,根据检测标本shu量que定所需试剂的量。

检查试剂盒内每种试剂的贮cun条件,保证所有试剂均按照试剂盒内shuoming书tuijian的条件cun储。

检查不稳定或者变质的试剂溶液(比如chen淀或变色)。有xie试剂,比如标准品稀释液或者检测稀释液,可能在设计时就含有chen淀物。所有试剂在滴入酶标板之前,bi需充分混yun。而you于chen淀物的特xing,在加入酶标板之前,bi需不停搅拌。

保证充分的fuyu时间和温du。

切勿使用不同生产批号的试剂取代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶解蛋bai溶液时,避免泡沫产生。

在实yan开shi之前,an排好实yan流程。

在实yan开shi之前,清洁工作台。

若有wen题,应与wogong司或代理商的糺i踔С至袋/span>

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒结果舩ie吸/span>:

1. 每个标准品的OD值减去空bai孔的OD值后作tu,如设置fu孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓du为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准qu线。亦可以OD值为横坐标,标准品的浓du为纵坐标,绘出标准qu线。

2. tuijian使用专业的qu线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根据样品OD值,you标准qu线查出相应的浓du,乘以稀释倍shu;亦可将样品的OD值代入标准qu线的拟合方程shi,计算出样品浓du,再乘以稀释倍shu,即为样品的实ji浓du。

3. 若样品OD值高于标准qu线上限,应适当稀释后重测,计算浓du时应乘以稀释倍shu。 

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒有效qi稳定xing考察

本试yan以巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)为li

1.  OD值:

正常保cun条件下有效qi内和超过有效qi2个月所测OD值比jiao

正常有效qi内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效qiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值血清及血jiang中加入襤uan康命/span>巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)标准品,重fu测定并计算其品均值,回收率为测定值与理论值的比率。

        正常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回收聅hi觳饨峁?/span>

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线xing:分别于定值血清及血jiang中加入襤uan康命/span>巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线xing范围即为稀释后样本中巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)含量的测定值与理论值的比率。

         正常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回线xing检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密du:以样苀an舛ㄖ档谋鋣i系shuCV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批磜en约梁xie詃i值,中值和高值样本进衳ie考觳猓糠菅jing舛?span>20次,分别计算不同浓du样本的平均值和SD值。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别对di、中、高值定值样本进衳ie坎舛ǎ 每个样本使用同一试剂盒重fu测定 8 次,分别计算不同浓du样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常保cun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回精密du检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

ren巨噬细胞集落刺ji因子(MCSF)试剂盒会出现的wen题及解决办法:

1. 加入反应终zhi液后,没有吸光值或吸光值偏di。

a.原因:未加入酶标记物。

解决办法:请按照操作bu骤进行。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

解决办法:que定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原因:shi温太di。

解决办法:若shi温太di(<19),请于操作bu骤4,适当延长温yu时间。

d.原因:未使用试剂盒的清xi液清xi。

解决办法: 请用试剂盒内所提gong的清xi液清xi。

e.原因:试剂盒yi过有效qi限。

解决办法:请更huan成reng在有效qi限内的试剂盒。

2. 标准qu线线xing不jia,或是平行xing不好。

a.原因:温yu位置避光不好或受dao气流gan扰。

解决办法: 请que认温yu位置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.原因:操作时间拖太久。

解决办法:请在方法熟练后再进行操作。

c.原因:微孔间相互污染。

解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。

解决办法:请使用yi校正过的移液枪,并que保其与吸tou之间有高du密合xing。

e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正que。

解决办法:加样品或试剂时,吸tou请勿jie触微孔。

f.原因:xi板过程发生wen题(如管路堵sai、xiwan板后未立刻进行下一bu骤)

解决办法:请随时监控xi板机xi板过程,xiwan后立即进行下一bu骤。

3. 吸光值均偏高(或线xing不筯uan伏/span>)

a.原因:shi温太高(>25)

解决办法: 若无法jiangdishi内温du,请适当缩短bu骤4的温yu时间。

b.原因:底物溶液受dao污染。

解决办法: 若发现底物溶液yicheng现淡蓝色,请不yao再使用。

c.原因:反应时间超过太久。

解决办法:请控制反应时间。

d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。

解决办法:使用过的吸tou应立即丢qi,可避免试糽iang湎嗷ノ廴荆琭an是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)jie触过的容器应立即清xigan净。(先以漂bai水浸泡,再以清水chongxigan净,可que保无残liu)

4. yinxing标准品的吸光值di于yangxing标准品的吸光值。

a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。

解决办法: 试糽iang觲an后,需qing敲盘四zhou使其充分混合均yun。

b.原因:xi板过程发生wen题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或酶标记物的量不一致。

解决办法: 请参考2-d.

bbin注册liu言
标题
联蟙eng庶/span>
联系电话
内容
yan证码
点击huan一zhang
注:1.可以使用kuai捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有biyao,请您liu下您的详细联系方shi!