bbin注cezi料

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒

如果您对该bbin注ce感兴趣的hua,ke以
bbin注ceming称: 人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒
bbin注ce型号: FBN1
bbin注ce展商: ELISA试剂盒
bbin注cewen档: 无相guanwen档

简dan介shao

m88


人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒  的详细介shao


人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒

shi用shuo明书

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒基ben原理:

ben试剂盒采用shuangbbinwang址夹心ELISA法。用抗人FBN1bbinwang址包被yu酶标ban上,实验时样品或标譲i分械娜薋BN1与包被bbinwang址jie合,游离的成分被xi去。依ci加ru生物素化的抗人FBN1bbinwang址和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人FBN1bbinwang址与jie合在包被bbinwang址蓌i娜薋BN1jie合、生物素与亲和素特异性jie合er形成**复合物,游离的成分被xi去。加ru显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终zhi液hou变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人FBN1浓度与OD450值之jian硈hou龋ü鎧hi标准曲线ji算出样品中人FBN1的浓秖uⅫ/span>

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒描述:

英wenming称 Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit
中wenming称 人原蟬huo鞍?(FBN1)酶联**xi附测定试剂盒
货号 X-EL-H2266c 謟hi簏/span> Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方法 shuangbbinwang址夹心法
jian测范wei 0.313~20ng/mL 灵min度 0.188ng/mL

试剂盒组成:

中wenming称

英wenming称

规格

保cun

  ELISA酶标ban(kechai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

donggan标譲i饵/span>

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标譲i饵/span>&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化bbinwang址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbinwang址稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶jie合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶jie合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩xi涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终zhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

fengban覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注ceshuo明书

Product  Description

  1 

 

zhijianbao告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuo明
*: [96T/48T](打kai包装hou请ji时jian查所有物品是否齐quan完整)
#: 
一zhou内shi用kecunyu4℃,xu长时jiancun放或多cishi用建议cunyu-20.                                      

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒jian测前准备gongzuo:

1. 请ti前20分钟从冰箱中qu出试剂盒,平heng至shi温。

2. 将浓缩xi涤液用shuangzheng水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中qu出的浓缩xi涤液ke能有jie晶,属yu正常现象,ke用40℃水浴微加热shijie晶完quan溶jiehou再配zhixi涤液(加热温度不要超过50℃,shi用时xi涤液应为shi温)。当rishi用。

3. 标譲i饵/span>yu10000×g离心1分钟,加ru标譲i饵/span>&样品稀释液1.0mL至donggan标譲i分校艄芨牵仓曼/span>10分钟,上下颠倒数ci,待其充分溶jiehou,用yi液qi将其qingqing混匀(浓度为8000pg/mL)。然hou根据xu要进行倍比稀释(注:不要直jie在反应孔中进行倍比稀释)。建议配zhi成以下浓度:an照稀释方法图li 标譲i饵/span>&样品稀释液直jiezuo为空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标譲i罚簈u0.5mL10ng/mL的上述标譲i芳觬u含有0.5mL标譲i饵/span>&样品稀释液的EP管中,混匀即ke,其余浓度依此lei推。 

4. 生物素化bbinwang址gongzuo液:实验前ji算当磜en笛樗鵻u用量(以100μL/孔ji),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分钟,以生物素化bbinwang址稀释液稀释浓缩生物素化bbinwang址(1:100)成gongzuo浓秖u5眗ishi用。

5. 酶jie合物gongzuo液:实验前ji算当磜en笛樗鵻u用量(以100μL/孔ji),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分钟,以酶jie合物稀释液稀释浓缩HRP酶jie合物(1:100)成gongzuo浓秖uⅫ/span>

当rishi用。

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒标譲i废∈头椒ㄍ糽i:(以500μL/管为li,yeke根据实际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加ru标譲i坊蜓犯鳇/span>100μL 37℃孵育90分钟

2. 加ru100μ生物素化bbinwang址gongzuo液,37℃孵育60分钟

3. xi涤3ci

4. 加ru100μL酶jie合物gongzuo液, 37℃孵育30分钟

5. xi涤5ci

6. 加ru90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右

7. 加ru50μL终zhi液,立即在450nm波长处测量OD

8. jie果ji算

一、操zuo因素对ELISAjie果的影响ELISA操zuo步zhou复杂,操zuo不当将引起jiao大的误差。以下叙述各个步zhou中的影响因素。

1.加样

2.温育

3.xi涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置通常情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来bao告jie果,两者jian有一条分界线被称为“阳性pan断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定jie果bao告的依据。

三、标ben复查ELISA手gongjian测过cheng复杂,影响因素jiao多,即shishi内zhi控在控,yeke能因孔jian差异er造成jie果的差异,因此加大复查li度是保证jie果准que性的kekao方法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的ke疑、弱阳衴uan阞enjishao见模shi的jian测jie果进行复查。

四、jie果pan断和bao告常用下列ji种方法表shijie果:

1.定性测定

2.半定量测定 jie果襤ua阋缘味缺韘hi。

3.定量测定 即用已知量的标譲i穤uo一xi列稀释hou进行ELISA测定,绘zhi标准曲线,jie果以优良量或dan位表shi。在ELISA定量jian测中每一块反应ban都必须绘zhi相应的标准曲线。

注意事xiang:

zi细yue读shuo明书。

jian查试剂盒标qian蓌i挠行凇H绻行冢胛餾hi用。

anshuo明书que定所有试剂齐quan(数量、体ji)。

标benzhi备要规范,每份标ben体ji要an2-3个复孔以蓌i牧縵hi备(zhucun),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保cun。

准备好所有实验额外所xu物品,(比如yi液qi,试管,清xiqi,酶标仪)。

anshuo明书将所用试剂平heng至shi温,根据jian测标ben数量que定所xu试剂的量。

jian查试剂盒内每謟hi约恋膠hucun条件,保证所有试剂均an照试剂盒内shuo明书推荐的条件cun储。

jian查不稳定或者变zhi的试剂溶液(比如沉淀或变色)。有xie试剂,比如标譲i废∈鸵夯蛘遤ian测稀释液,ke能在设ji蔮en秃谐恋砦铩K惺约猎诘蝦u酶标ban之前,必xu充分混詑ur由yu沉淀物的特性,在加ru酶标ban之前,必xu不停搅拌。

保证充分的孵育时jian和温秖uⅫ/span>

切勿shi用不同生产批号的试剂qu代现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶jie蛋白溶液时,避免pao沫产生。

在实验kai始之前,安排好实验流cheng。

在实验kai始之前,清洁gongzuo台。

若有wen题,应与我公司或代理商的技术支持联xi

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒jie果pan断:

1. 每个标譲i返命/span>OD值减去空白孔的OD值houzuo图,如设置复孔,ze应qu其平均值ji算。襶uan曜ji返呐ǘ任猦eng坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。亦ke以OD值为heng坐标,标譲i返呐ǘ任葑辏娉霰曜记摺Ⅻ/span>

2. 推荐shi用专业的曲线zhizuo软件,如curve expert 1.31.4,在软件界mian既ke根据样品OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦ke将样品的OD值代ru标准曲线的拟合方chengshi,ji算出样品浓度,再乘以稀释倍数,糲i返氖导逝ǘquⅫ/span>

3. 若样品OD值高yu标准曲线上限,应适当稀释hou重测,ji算浓度时应乘以稀释倍数。 

原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒有效期稳定性考察

ben试验以原蟬huo鞍?(FBN1)为li

1.        OD值:

正常保cun条件下有效期内和超过有效期2个月所测OD值比jiao

正常有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回shou率:分别yu定值血清ji血浆中加ru一定量的原蟬huo鞍?(FBN1)标譲i罚馗床舛úi算其品均值,回shou率为测定值与理论值的比率。

        正常保cun条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回shou率jian测jie果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:分别yu定值血清ji血浆中加ru一定量的原蟬huo鞍?(FBN1)标譲i罚⒔阞enan1:2,1:4,1:8稀释,线性范wei糲i∈蚳ou样ben中原蟬huo鞍?(FBN1)含量的测定值与理论值的比率。

         正常保cun条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回线性jian测jie果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        jingmi度:以样品测定值的变异xi数CV表shi。CV%=SD/meanx100

批内差:qu同一批磜en约梁卸缘椭担兄岛透咧笛鵥en进行定量jian测,每份样ben测定20ci,分别ji算不同浓度样ben的平均值和SD值。

批jian差:xuanqu 3 个不同批ci的试剂盒分别对低、中、高值定值样ben进行定量测定, 每个样benshi用同一试剂盒重复测定 8 ci,分别ji算不同浓度样ben的平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保cun条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回jingmi度jian测jie果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人原蟬huo鞍?(FBN1)试剂盒会出现的wen题jijie决办法:

1. 加ru反应终zhi液hou,没有xi光值或xi光值偏低。

a.原因:未加ru酶标记物。

jie决办法:请an照操zuo步zhou进行。

b.原因:试剂盒内容物未能充分回。

jie决办法:que定试剂盒内容物回温hou再进行操zuo。

c.原因:shi温tai低。

jie决办法:若shi温tai低(<19),请yu操zuo步zhou4,适当yan长温育时jian。

d.原因:未shi用试剂盒的清xi液清xi。

jie决办法: 请用试剂盒内所ti供的清xi液清xi。

e.原因:试剂盒已过有效期限。

jie决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温育位置避光不好或受到qi流gan扰。

jie决办法: 请que认温育位置既不透光ye不透feng(如抽屉内)

b.原因:操zuo时jian拖tai久。

jie决办法:请在方法熟练hou再进行操zuo。

c.原因:微孔jian相互污染。

jie决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

d.原因:标譲i坊蛎副昙俏锼觬u的量不一致。

jie决办法:请shi用已校正过的yi液枪,并que保其与xi头之jian有高度mi合性。

e.原因:tian加样品或试剂的操zuo方法不正que。

jie决办法:加样品或试剂时,xi头请勿jie触微孔。

f.原因:xiban过cheng发生wen题(如管路堵sai、xi完banhou未立刻进行下一步zhou)

jie决办法:请随时监控xiban机xiban过cheng,xi完hou立即进行下一步zhou。

3. xi光值均偏高(或线性不够陡)

a.原因:shi温tai高(>25)

jie决办法: 若无法降低shi内温度,请适当缩短步zhou4的温育时jian。

b.原因:底物溶液受到污染。

jie决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再shi用。

c.原因:反应时jian超过tai久。

jie决办法:请控zhi反应时jian。

d.原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。

jie决办法:shi用过的xi头应立即ding弃,ke避免试剂jian相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)jie触过的容qi应立即清xigan净。(先以漂白水jinpao,再以清水冲xigan净,keque保无can留)

4. 阴衴uan曜ji返膞i光值低yu阳衴uan曜ji返膞i光值。

a.原因:微孔中的试剂未能充分混合。

jie决办法: 试剂加完hou,xuqing敲pan四zhoushi其充分混合均詑uⅫ/span>

b.原因:xiban过cheng发生wen题(2-f.)

jie决办法:请can考2-f.

c.原因:tian加样品或酶标记物的量不一致。

jie决办法: 请can考2-d.

 

bbin注ce留言
标题
联xi人
联xi电hua
内容
验证ma
dian击换一张
注:1.ke以shi用kuai捷键Alt+S或Ctrl+Enter发song信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联xi方shi!