bbin注册资料

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe

如guo您dui该bbin注册感兴趣的话,可yi
bbin注册名称: 人原纤蛋白3(FBN3)试jihe
bbin注册型hao: FBN3
bbin注册zhanshang: ELISA试jihe
bbin注册wen档: 无相关wen档

简dan介shao

和记旗舰下载


人原纤蛋白3(FBN3)试jihe  的详细介shao


人原纤蛋白3(FBN3)试jihe

shi用说明书

人原纤蛋白3(FBN3)试jiheji本原理:

本试jihe采用shuangbbin网址夹xinELISA法。用kang人FBN3bbin网址包被yu酶标板上,实验时样品或标准品中的人FBN3与包被bbin网址结he,游离的成分被洗qu。依ci加入生wu素化的kang人FBN3bbin网址和辣根guo氧化wu酶标记的亲和素。kang人FBN3bbin网址与结he在包被bbin网址上的人FBN3结he、生wu素与亲和素特yi性结he而形成**复hewu,游离的成分被洗qu。加入显色diwu(TMB),TMB在辣根guo氧化wu酶的催化xia呈xian蓝色,加终止ye后bian成黄色。用酶标yi在450nmbochang处ceODzhi,人FBN3浓度与OD450zhizhi间呈正比,通guo绘zhi标准曲线计suan出样品中人FBN3的浓度。

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe描述:

英wen名称 Human FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit
中wen名称 人原纤蛋白3(FBN3)酶lian**吸附ce定试jihe
货hao X-EL-H2268c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方法 shuangbbin网址夹xin法
检cefanwei 0.313~20ng/mL 灵敏度 0.188ng/mL

试jihe组成:

中wen名称

英wen名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生wu素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化bbin网址稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结hewu

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结hewu稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

diwu溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注册说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请ji时检查所有wu品是否齐全wan整)
#: 
一周内shi用可存yu4℃,需chang时间存fang或多cishi用建议存yu-20.                                      

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe检ce前准备工作:

1. 请ti前20分钟从冰箱中取出试jihe,平衡至室温。

2. 将浓缩洗涤ye用shuangzheng水稀释(1:25)。未用wan的fang回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤ye可能有结晶,属yu正常xian象,可用40℃水浴微加热shi结晶wan全溶解后zai配zhi洗涤ye(加热温度瞙ui猚haoguo50℃,shi用时洗涤ye应wei室温)。dang日shi用。

3. 标准品yu10000×g离xin1分钟,加入标准品&样品稀释ye1.0mL至冻干标准品中,旋紧管盖,静zhi10分钟,上xiadian倒shuci,待其充分溶解后,用移ye器将其轻轻混匀(浓度wei8000pg/mL)。然后根ju需要进行倍比稀释(注:瞙ui苯釉诜从字薪斜侗认∈停=ㄒ榕鋤hi成yixia浓度:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释ye直接作wei空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品加入含有0.5mL标准品&样品稀释ye的EP管中,混匀ji可,其余浓度依磗i嗤啤Ⅻ/span> 

4. 生wu素化bbin网址工作ye:实验前计suandangci实验所需用量(yi100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分钟,yi生wu素化bbin网址稀释ye稀释浓缩生wu素化bbin网址(1:100)成工作浓度。dang日shi用。

5. 酶结hewu工作ye:实验前计suandangci实验所需用量(yi100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。shi用前15分钟,yi酶结hewu稀释ye稀释浓缩HRP酶结hewu(1:100)成工作浓度。

dang日shi用。

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe标准品稀释方法图例:(yi500μL/管wei例,ye可根ju实际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标准品或样品各100μL 37℃孵育90分钟

2. 加入100μ生wu素化bbin网址工作ye,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3ci

4. 加入100μL酶结hewu工作ye, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5ci

6. 加入90μLdiwu溶ye, 37℃孵育15分钟左右

7. 加入50μL终止ye,立ji在450nmbochang处ce量ODzhi

8. 结guo计suan

一、操作yin素duiELISA结guo的影响ELISA操作步骤复za,操作budang将yin起较大的误差。yixia叙述各个步骤中的影响yin素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、粂i纳鑪hi通常情况xia,ELISA定性实验yi“阳性”和“阴性”来报告结guo,两者间有一条分界线被称wei“阳性舩ie蟴hi”(cut-off valueCOzhi),这是定性**ce定结guo报告的依ju。

san、标本复查ELISA手工检ceguo程复za,影响yin素较多,jishi室内质控在控,ye可能yin孔间差yi而造成结guo的差yi,yin此加大复查力度是保证结guo譲i沸缘目煽糠椒ǎ热鏳uiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本ji少jianmo蔶iang募靋e结guo进行复查。

四、结guo舩ie虾捅ǜ娉S脁ialie几种方法表shi结guo:

1.定性ce定

2.半定量ce定 结guo一般yi滴度表shi。

3.定量ce定 ji用已zhi量的标准品作一系lie稀释后进行ELISAce定,绘zhi标准曲线,结guo襷a帕ji炕騞an位表shi。在ELISA定量检ce中每一块反应板都必须绘zhi相应的标准曲线。

注意shi项:

仔细阅秎iao得魇椤Ⅻ/span>

检查试jihe标签上的有效期。如guochaoguo有效期,请勿shi用。

按说明书萬anㄋ惺詊i齐全(shu量、体积)。

标本zhi备要规fan,每份标本体积要按2-3个复孔yi上的量zhi备(贮存),尽量分装zuo备份。短期内无法实验者,注意低温保存。

准备好所有实验额wai所需wu品,(比如移ye器,试管,清洗器,酶标yi)。

按说明书将所用试ji平衡至室温,根ju检ce标本shu量萬anㄋ枋詊i的量。

检查试ji簒in诿恐质詊i的贮存条jian,保证所有试ji均按照试ji簒in谒得魇橥萍龅奶鮦ian存储。

检查bu稳定或者bian质的试ji溶ye(比如沉dian或bian色)。有些试ji,比如标准品稀释ye或者检ce稀释ye,可能在设计时就含有沉dianwu。所有试ji在滴入酶标板zhi前,必需充分混匀。而由yu沉dianwu的特性,在加入酶标板zhi前,必需bu停搅拌。

保证充穤hi姆跤奔浜臀露取Ⅻ/span>

切勿shi用bu同生产pihao的试ji取代xian有试ji或混hexian有试ji。

在混he或溶解蛋白溶ye时,bi免泡沫产生。

在实验开始zhi前,癱ai藕檬笛榱鞒獭Ⅻ/span>

在实验开始zhi前,清洁工作台。

若有wen题,应与我公薺ing虼韘hang的技术支持lian系

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe结guo舩ie吸/span>:

1. 每个标准品的ODzhi减qu空白孔的ODzhi后作图,如设zhi复孔,则应取其平均zhi计suan。yi标准品的浓度wei横zuo标,ODzhiweizongzuo标,绘出标准曲线。yi可yiODzhiwei横zuo标,标准品的浓度weizongzuo标,绘出标准曲线。

2. 推荐shi用专业的曲线zhi作软jian,如curve expert 1.31.4,在软jian界面ji可根ju样品ODzhi,由标准曲线查出相应的浓度,乘yi稀释倍shu;yi可将样品的ODzhi代入标准曲线的拟he方程式,计suan出样苀angǘ龋瑉ai乘yi稀释倍shu,jiwei样品的实际浓度。

3. 若样品ODzhi高yu标准曲线上xian,应适dang稀释后重ce,计suan浓度时应乘yi稀释倍shu。 

原纤蛋白3(FBN3)试jihe有效期稳定性考察

本试验yi原纤蛋白3(FBN3)wei例

1.        ODzhi:

正常保存条jianxia有效期内和chaoguo有效期2个月所ceODzhi比较

正常有效期内ODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

chaoguo2个月有效期ODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别yu定zhi血清ji血浆中加入一定量的原纤蛋白3(FBN3)标准品,重复ce定bing计suan其品均zhi,回收率weice定zhi与理lunzhi的比率。

        正常保存条jianxia有效期内和guo有效期2个月elisa 试jihe回收率检ce结guo

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:分别yu定zhi血清ji血浆中加入一定量的原纤蛋白3(FBN3)标准品,bing将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性fanweijiwei稀释后样本中原纤蛋白3(FBN3)含量的ce定zhi与理lunzhi的比率。

         正常保存条jianxia有效期内和guo有效期2个月elisa 试jihe回线性检ce结guo

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:yi样品ce定zhi的bianyi系shuCV表shi。CV%=SD/meanx100

pi内差:取同一pici试ji簒ie缘蛕hi,中zhi和高zhi样本进衳ie考靋e,每份样本ce定20ci,分别计suanbu同浓度样本的平均zhi和SDzhi。

pi间差:选取 3 个bu同pici的试jihe分别dui低、中、高zhi定zhi样本进衳ie縞e定, 每个样本shi用同一试jihe重复ce定 8 ci,分别计suanbu同浓度样本的平均zhiji SD zhi。(pi内差: CV<10%;pi间差: CV<11%)

       正常保存条jianxia有效期内和guo有效期2个月elisa 试jihe回精密度检ce结guo

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人原纤蛋白3(FBN3)试jihe会出蟴hi膚en题ji解决办法:

1. 加入反应终止ye后,没有吸光zhi或吸光zhi偏低。

a.原yin:未加入酶标记wu。

解决办法:请按照操作步骤进行。

b.原yin:试ji簒in谌輜u未能充分回。

解决办法:萬anㄊ詊i簒in谌輜u回温后zai进行操作。

c.原yin:室温tai低。

解决办法:若室温tai低(<19),请yu操作步骤4,适dang延chang温育时间。

d.原yin:未shi用试jihe的清洗ye清洗。

解决办法: 请用试ji簒in谒鵷igong的清洗ye清洗。

e.原yin:试jihe已guo有效期xian。

解决办法:请更换成仍在有效期xian内的试jihe。

2. 标准曲线线性bu佳,或是平行性bu好。

a.原yin:温育位zhibi光bu好或受到气流干rao。

解决办法: 请确认温育位zhijibu透光yebu透风(如抽屉内)

b.原yin:操作时间拖tai久。

解决办法:请在方法熟练后zai进行操作。

c.原yin:微孔间相互污染。

解决办法: 加样品时,请小xin勿溅出微孔wai,yi免造成其它微孔的污染。

d.原yin:标准品或酶标记wu所加入的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法:请shi用已校正guo的移ye枪,bing确保其与吸头zhi间有高度密he性。

e.原yin:tian加样品或试ji的操作方法bu正确。

解决办法:加样品或试ji时,吸头请勿接触微孔。

f.原yine窗錱uo程发生wen题(如管耭an氯⑾磜an板后未立刻进行xia一步骤)

解决办法:请sui时监控洗板机洗板guo程,洗wan后立ji进行xia一步骤。

3. 吸光zhi均偏高(或线性bu够dou)

a.原yin:室温tai高(>25)

解决办法: 若无法jiang低室内温度,请适dang缩短步骤4的温育时间。

b.原yin:diwu溶ye受到污染。

解决办法: 若发蟴hi譿u溶ye已呈蟴hi渡氩hui獄aishi用。

c.原yin:反应时间chaoguotai久。

解决办法:请控zhi反应时间。

d.原yin:酶标记wu污染liao簒in谄渌詊i。

解决办法:shi用guo的吸头应立ji丢弃,可bi免试ji间相互污染,凡是试ji(特别蕅iao副昙莣u与diwu溶ye)接触guo的容器应立ji清洗干jing。(先yi漂白水浸泡,zaiyi清水冲洗干jing,可确保无残liu)

4. 阴性标准品的吸光zhi低yu阳性标准品的吸光zhi。

a.原yin:微孔中的试ji未能充分混he。

解决办法: 试ji加wan后,需轻qiao盘四周shi其充分混he均匀。

b.原yine窗錱uo程发生wen题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原yin:tian加样品或酶标记wu的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法: 请参考2-d.