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人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒

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人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒  的xiang细介shao


人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒

使用shuo明书

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒基本原理:

本试剂盒采用双bbin网址夹xinELISA法。用kang人mxd1bbin网址baobeiyu酶标板上,实验时样pin或标准苀en械娜薽xd1与baobeibbin网址结合,游li的成fenbei洗qu。依ci加入生物素化的kang人mxd1bbin网址和辣根guoyang化物酶标记的亲和素。kang人mxd1bbin网址与结合zaibaobeibbin网址上的人mxd1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成**复合物,游li的成fenbei洗qu。加入显色底物(TMB),TMBzai辣根guoyang化物酶的cui化下cheng现蓝色,加终zhiye后变成黄色。用酶标仪zai450nm波长处测ODzhi,人mxd1浓度与OD450zhi之jiancheng正比,通guohui制标准曲线计算出样苀en腥薽xd1的浓秖uⅫ/span>

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒miao述:

英文名chen Human MXD1 (MAX Dimerization Protein 1) ELISA Kit
zhong文名chen 人MAX二聚化dan白1(mxd1)酶联**xi附测定试剂盒
货号 X-EL-H0896c zhong属 Human/人
guige 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双bbin网址夹xin法
检测范围 0~ 灵敏度 0

试剂盒组成:

zhong文名chen

英文名chen

guige

保存

  ELISA酶标板(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准pin

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准pin&样pin稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suo生物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbin网址稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结合物稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

穋ongχ誾hiye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注册shuo明书

Product  Description

  1 

 

謘hi靊ao告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuo明
*: [96T/48T](da开bao装后请及时检查所有物pin是否齐quanwanzheng)
#: 
一周内使用可存yu4℃,需长时jian存放或多ci使用建议存yu-20.                                      

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒检测前准备工作:

1. 请提前20fenzhongcong冰xiangzhongqu出试剂盒,平衡至室温。

2. 将浓suo洗涤ye用双蒸水稀释(1:25)。wei用wan的放回4℃。cong冰xiangzhongqu出的浓suo洗涤ye可能有结晶,属yu正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶wanquan溶解后zai配制洗涤ye(加热温度不yao超guo50℃,使用时洗涤ye应wei室温)。当日使用。

3. 标准pinyu10000×glixin1fenzhong,加入标准pin&样pin稀释ye1.0mL至冻干标准苀en校艄芨牵仓曼/span>10fenzhong,上下颠倒数ci,待其充fen溶解后,用移ye器将其qingqinghun匀(浓度wei8000pg/mL)。然后根据需yao进行倍比稀蕋ingㄗⅲ翰粂ao直接zai穋ong讂hong进行倍比稀蕋ing=ㄒ榕渲瞥梢韵屡ǘ龋喊凑障∈头椒ㄍ祭?/span> 标准pin&样pin稀释ye直接作weikong白孔0ng/mL。ru配制5ng/mL标准pin:qu0.5mL10ng/mL的上述标准pin加入含有0.5mL标准pin&样pin稀释ye的EP管zhong,hun匀即可,其yu浓度依此类推。 

4. 生物素化bbin网址工作ye:实验前计算当ci实验所需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15fenzhong,以生物素化bbin网址稀释ye稀释浓suo生物素化bbin网址(1:100)成工作浓秖u5比帐褂谩Ⅻ/span>

5. 酶结合物工作ye:实验前计算当ci实验所需用liang(以100μL/孔计),实际配制时应多配制100-200μL。使用前15fenzhong,以酶结合物稀释ye稀释浓suoHRP酶结合物(1:100)成工作浓秖uⅫ/span>

当日使用。

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒标准pin稀释方法图例:(以500μL/管wei例,也可根据实际用liang来稀蕋ing瑀u200μL/管)

            

1. zaige孔zhong加入标准pin或样pinge100μL 37℃孵育90fenzhong

2. 加入100μ生物素化bbin网址工作ye,37℃孵育60fenzhong

3. 洗涤3ci

4. 加入100μL酶结合物工作ye, 37℃孵育30fenzhong

5. 洗涤5ci

6. 加入90μL底物溶ye, 37℃孵育15fenzhongzuo右

7. 加入50μL终zhiye,立即zai450nm波长处测liangODzhi

8. 结果计算

一、操作因素对ELISA结果的ying响ELISA操作bu骤复杂,操作不当将引起较da的误差。以下xu述ge个bu骤zhong的ying响因素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、hui区的设置通常qing况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来bao告结果,liangzhejian有一条fen界线beichenwei“阳性panduanzhi”(cut-off valueCOzhi),这是定性**测定结果bao告的依据。

san、标本复查ELISA蕑hiぜ觳鈍uo程复杂,ying响因素较多,即使室内质控zai控,也可能因孔jian差异而造成结果的差异,因此加da复查力度是保证结果准确性的可靠方法,比ru对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。

四、结果panduan和bao告常用下列jizhong方法表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一般以滴度表示。

3.定liang测定 糲ong脃i知liang的标准pin作一系列稀释后进行ELISA测定,hui制标准曲线,结果以优liangliang或单位表示。zaiELISA定liang检测zhong每一块穋ongΠ宥急匦雋ui制相应的标准曲线。

注yi事项:

zi细阅读shuo明书。

检查试剂盒标签上的有效qi。ru果超guo有效qi,请wu使用。

按shuo明书确定所有试剂齐quan(数liang、体积)。

标本制备yaogui范,每份标本体积yao按2-3个复孔以上的liang制备(贮存),尽liangfen装zuo备份。duanqi内无法实验zhe,注yi低温保存。

准备好所有实验额外所需物pin,(比ru移ye器,试管,清洗器,酶标仪)。

按shuo明书将所用试剂平衡至室温,根据检测标本数liang确定所需试剂的liang。

检查试剂簒in诿縵hong试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂簒in趕huo明书推荐的条件存储。

检查不wen定或zhe变质的试剂溶ye(比ru沉淀或变色)。有些试糽i萺u标准pin稀释ye或zhe检测稀释ye,可能zai设计时就含有沉淀物。所有试剂zai祑en朊副臧逯埃匦璩鋐enhun詑u6蓎u沉淀物的特性,zai加入酶标板之前,必需不ting搅ban。

保证充fen的孵育时jian和温秖uⅫ/span>

切wu使用不同生产批号的试剂qu代蟴hong惺约粱騢un合蟴hong惺约痢Ⅻ/span>

zaihun合或溶解dan白溶ye时,bi免泡沫产生。

zai实验开shi之前,安排好实验流程。

zai实验开shi之前,清洁工作tai。

若有问题,应与我公司或代理shang的ji术支持联系

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒结果panduan:

1. 每个标准pin的ODzhi减qukong白孔的ODzhi后作图,ru设置复孔,则应qu其平均zhi计算。以标准pin的浓度wei横坐标,ODzhiwei纵坐标,hui出标准曲线。亦可以ODzhiwei横坐标,标准pin的浓度wei纵坐标,hui出标准曲线。

2. 推荐使用专ye的曲线制作软件,rucurve expert 1.31.4,zai软件界面既可根据样pinODzhi,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数ui嗫山鵳in的ODzhi代入标准曲线的拟合方程式,计算出样pin浓度,zai乘以稀释倍数,糲i鵳in的实际浓秖uⅫ/span>

3. 若样pinODzhi高yu标准曲线上限,应适当稀释后zhong测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 

MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒有效qiwen定性考察

本试验以MAX二聚化dan白1(mxd1)wei例

1.        ODzhi:

正常保存条件下有效qi内和超guo有效qi2个月所测ODzhi比较

正常有效qi内ODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超guo2个月有效qiODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:fen别yu定zhi血清及血浆zhong加入一定liang的MAX二聚化dan白1(mxd1)标准pin,zhong复测定并计算其pin均zhi,回收率wei测定zhi与理论zhi的比率。

        正常保存条件下有效qi内和guo有效qi2个月elisa 试剂盒回收聅hi觳饨峁?/span>

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:fen别yu定zhi血清及血浆zhong加入一定liang的MAX二聚化dan白1(mxd1)标准pin,并将标本按1:2,1:4,1:8稀蕋ing咝苑段Ъci∈秃笱緕hongMAX二聚化dan白1(mxd1)含liang的测定zhi与理论zhi的比率。

         正常保存条件下有效qi内和guo有效qi2个月elisa 试剂盒回线性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        jing密度:以样pin测定zhi的变异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:qu同一批ci试剂簒ie缘蛕hi,zhongzhi和高zhi样本进衳ie╨iang检测,每份样本测定20ci,fen别计算不同浓度样本的平均zhi和SDzhi。

批jian差:选qu 3 个不同批ci的试剂盒fen别对低、zhong、高zhi定zhi样本进衳ie╨iang测定, 每个样本使用同一试剂盒zhong复测定 8 ci,fen别计算不同浓度样本的平均zhi及 SD zhi。(批内差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存条件下有效qi内和guo有效qi2个月elisa 试剂盒回jing密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人MAX二聚化dan白1(mxd1)试剂盒会出蟴hi奈侍饧敖饩霭旆ǎ裹/span>

1. 加入穋ongχ誾hiye后,没有xi光zhi或xi光zhi偏低。

a.原因:wei加入酶标记物。

解决办法:请按照操作bu骤进行。

b.原因:试剂簒in趓ong物wei能充fen回。

解决办法:确定试剂簒in趓ong物回温后zai进行操作。

c.原因:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19),请yu操作bu骤4,适当延长温育时jian。

d.原因:wei使用试剂盒的清洗ye清洗。

解决办法: 请用试剂簒in谒醙ong的清洗ye清洗。

e.原因:试剂盒yiguo有效qi限。

解决办法:请更换成仍zai有效qi限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不jia,或是平行性不好。

a.原因:温育位置bi光不好或受到气流干扰。

解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(ru抽屉内)

b.原因:操作时jian拖太jiu。

解决办法:请zai方法熟lian后zai进行操作。

c.原因:微孔jian相互污ran。

解决办法: 加样pin时,请小xinwu溅出微孔外,以免造成其ta微孔的污ran。

d.原因:标准pin或酶标记物所加入的liang瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法:请使用yi校正guo的移ye枪,并确保其与xi蚮en甹ian有高度密合性。

e.原因:tian加样pin或试剂的操作方法不正确。

解决办法:加样pin或试剂时,xi头请wu接chu微孔。

f.原因:洗板guo程发生问题(ru管路堵sai、洗wan板后wei立ke进行下一bu骤)

解决办法:请随时监控洗板机洗板guo程,洗wan后立即进行下一bu骤。

3. xi光zhi均偏高(或线性不够陡)

a.原因:室温太高(>25)

解决办法: 若无法降低室内温度,请适当suoduanbu骤4的温育时jian。

b.原因:底物溶ye受到污ran。

解决办法: 若发蟴hi孜锶躽eyicheng蟴hi渡氩粂aozai使用。

c.原因:穋ongκ眏ian超guo太jiu。

解决办法:请控謕incongκ眏ian。

d.原因:酶标记物污ran了簒in谄鋞a试剂。

解决办法:使用guo的xi头应立即丢弃,可bi免试剂jian相互污ran,fan是试剂(特别是酶标记物与底物溶ye)接chuguo的rong器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,zai以清水冲洗干净,可确保无残留)

4. 阴性标准pin的xi光zhi低yu阳性标准pin的xi光zhi。

a.原因:微孔zhong的试剂wei能充fenhun合。

解决办法: 试糽iang觲an后,需qing敲pan四周使其充fenhun合均詑uⅫ/span>

b.原因:洗板guo程发生问题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.原因:tian加样pin或酶标记物的liang瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法: 请参考2-d.