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人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒

如果您对该bbin注册感兴qude话,可以
bbin注册名称: 人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒
bbin注册型号: ACE
bbin注册展商: ELISA试剂盒
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简dan介绍

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人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒  de详xi介绍


人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒

使用说明shu

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒基本原理:

本试剂盒采用双bbin网址夹心ELISA法。用抗人ACEbbin网址包被yu酶标板shang,shiyanshiyang品或标准品中de人ACEyu包被bbin网址结合,you离decheng分被洗去。依次加入生物suhuade抗人ACEbbin网址和辣根过yanghua物酶标记de亲和su。抗人ACEbbin网址yu结合在包被bbin网址shangde人ACE结合、生物suyu亲和su特异性结合而xingcheng**复合物,you离decheng分被洗去。加入显se底物(TMB),TMB在辣根过yanghua物酶de催hua下呈现蓝se,加终止液后变cheng黄se。用酶标仪在450nmbo长处ceOD值,人ACE浓度yuOD450值zhi间呈正比,通过绘制标准曲线计算出yang品中人ACEde浓度。

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒描shu:

英文名称 Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)酶lian**吸fuce定试剂盒
货号 X-EL-H0002c zhong属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方法 双bbin网址夹心法
检ce范wei 0.781~50ng/mL ling敏度 0.469ng/mL

试剂盒组cheng:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

baocun

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&yang品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓suo生物suhuabbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物suhuabbin网址稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suoHRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

胒u岷衔锵∈鸵裹/span>

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓suo洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反ying终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆mo

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注册说明shu

Product  Description

  1 

 

謘hi毂ǜ妩/span>

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请及shi检查所觴ing锲肥欠駋iquan完整)
#: 
一zhou内使用可cunyu4℃,需长shi间cun放或多次使用建yicunyu-20.                                      

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒检ceqian准备工zuo:

1. 请提qian20穤hong哟颖渲腥〕鍪约梁xiao琾ing衡至室温。

2. 将浓suo洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完de放回4℃。从冰箱中取出de浓suo洗涤液可能有结晶,属yu正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶完quan溶解后zaipei制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用shi洗涤液ying为室温)。当日使用。

3. 标准品yu10000×g离心1穤hong樱尤氡曜计饵/span>&yang品稀释液1.0mL至冻gan标准品謝iao艄躦ai,静置10穤hong樱瑂hang下颠倒数次,待其chong分溶解后,用移液器将其轻轻混yun(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在反ying孔中进行倍比稀释)。建yipei制cheng以下浓度:按照稀释方法图li 标准品&yang品稀释液直接zuo为空白孔0ng/mL。如pei制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mLdeshangshu标准品加入含有0.5mL标准品&yang品稀释液deEP管謝iao靬un即可,其余浓度依此类推。 

4. 生物suhuabbin网址工zuo液:shiyanqian计算当次shiyan所需用量(以100μL/孔计),shi际pei制shiying多pei制100-200μL。使用qian15穤hong樱陨飐uhuabbin网址稀释液稀释浓suo生物suhuabbin网址(1:100)cheng工zuo浓度。当日使用。

5. 胒u岷衔锕uo液:shiyanqian计算当次shiyan所需用量(以100μL/孔计),shi际pei制shiying多pei制100-200μL。使用qian15穤hong樱悦fu岷衔锵∈鸵合∈团╯uoHRP胒u岷衔铧/span>(1:100)cheng工zuo浓度。

当日使用。

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒标准品稀释方法图li:(以500μL/管为li,也可根据shi际用量来稀释,如200μL/管)

            

1. 在ge孔中加入标准品或yang品ge100μL 37℃孵育90穤hong尹/span>

2. 加入100μ生物suhuabbin网址工zuo液,37℃孵育60穤hong尹/span>

3. 洗涤3

4. 加入100μL胒u岷衔锕uo液, 37℃孵育30穤hong尹/span>

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15穤hong幼笥腰/span>

7. 加入50μL终止液,立即在450nmbo长处ce量OD

8. 结果计算

一、caozuoyinsu对ELISA结果deying响ELISAcaozuo步骤复杂,caozuo不当将引qi较dade误差。以下叙shuge个步骤中deying响yinsu。

1.加yang

2.温育

3.洗涤

4.显se

5.比se

二、灰区de设置通常qing况下,ELISA定性shiyan以“阳性”和“yin性”来报告结果,两者间有一条分界线被称为“阳性pan断值ao?/span>cut-off valueCO值),这是定性**ce定结果报告de依据。

三、标本复查ELISA手工检ce过程复杂,ying响yinsu较多,即使室内质控在控,也可能yin孔间差异而zaocheng结果de差异,yin此加da复查力度是bao证结果譲i沸詃e可kao方法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Abdeng项目de可yi、ruo阳性标本及shao见模shide检ce结果进行复查。

四、结果pan断和报告常用下列jizhong方法表示结果:

1.定性ce定

2.半定量ce定 结果一般以滴度表示。

3.定量ce定 即用已知量de标准品zuo一系列稀释后进行ELISAce定,绘制标准曲线,结果以youliang量或dan位表示。在ELISA定量检ce中每一kuai反ying板du必须绘制xiangyingde标准曲线。

注意shi项:

仔xi阅读说明shu。

检查试剂盒标qianshangde有效qi。如果超过有效qi,请勿使用。

按说明shu确定所有试剂qiquan(数量、ti积)。

标本制备要规范,每份标本ti积要按2-3个复孔以shangde量制备(贮cun),尽量分装做备份。短qi内无法shiyan者,注意低温baocun。

准备好所有shiyane外所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,酶标仪)。

按说明shu将所用试剂ping衡至室温,根据检ce标本数量确定所需试剂de量。

检查试剂盒内每zhong试剂de贮cun条件,bao证所有试剂jun按照试剂盒内说明shu推荐de条件cun储。

检查不稳定或者变质de试剂溶液(比如沉淀或变se)。有些试糽i热绫曜计废∈鸵夯蛘呒靋e稀释液,可能在设计shi就含有沉淀物。所有试剂在滴入酶标板zhiqian,必需chong分混yun。而由yu沉淀物de特性,在加入酶标板zhiqian,必需不停搅ban。

bao证chong分de孵育shi间和温度。

莤ing鹗褂貌煌興e试剂取代蟴hong惺约粱蚧旌舷zhong惺约痢Ⅻ/span>

在混合或溶解蛋白溶液蔮ao躮ian泡mo产生。

在shiyan开shizhiqian,安排好shiyan流程。

在shiyan开shizhiqian,清洁工zuotai。

若觴ing侍猓瑈ingyu我公si或代理商de技术支持lian系

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒结果pan断:

1. 每个标准品deOD值减去空白孔deOD值后zuo图,如设置复孔,则ying取其pingjun值计算。以标准品de浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。yi可以OD值为横坐标,标准品de浓度为纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业de曲线制zuoruan件,如curve expert 1.31.4,在ruan件界面ji可根据yang品OD值,由标准曲线查出xiangyingde浓度,cheng以稀释倍数;yi可将yang品deOD值代入标准曲线de拟合方程shi,计算出yang品浓度,zaicheng以稀释倍数,即为yang品deshi际浓度。

3. 若yang品OD值高yu标准曲线shang限,ying蕇hi毕∈秃笾豤e,计算浓度shiyingcheng以稀释倍数。 

血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒有效qi稳定性考察

本试yan以血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)为li

1.        OD值:

正常baocun条件下有效qi内和超过有效qi2个月所ceOD值比较

正常有效qi内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效qiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别yu定值血清及血浆中加入一定量de血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)标准品,重复ce定并计算其品jun值,回收率为ce定值yu理论值de比率。

        正常baocun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回收聅hi靋e结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:分别yu定值血清及血浆中加入一定量de血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范wei即为稀释后yang本中血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)含量dece定值yu理论值de比率。

         正常baocun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回线性检ce结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        jing密度:以yang品ce定值de变异系数CV表示。CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂盒对低值,中值和高值yang本进行定量检ce,每份yang本ce定20次,分别计算不同浓度yang本depingjun值和SD值。

批间差:xuan取 3 个不同批次de试剂盒分别对低、中、高值定值yang本进行定量ce定, 每个yang本使用同一试剂盒重复ce定 8 次,分别计算不同浓度yang本depingjun值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正常baocun条件下有效qi内和过有效qi2个月elisa 试剂盒回jing密度检ce结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人血管紧张suzhuanhua酶 (ACE)试剂盒会出现de问题及解决办法:

1. 加入反ying终止液后,没觴ing庵祷蛭庵祊ian低。

a.原yin:未加入酶标记物。

解决办法:请按照caozuo步骤进行。

b.原yin:试剂盒内容物未能chong分回。

解决办法:确定试剂盒内容物回温后zai进行caozuo。

c.原yin:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19),请yucaozuo步骤4,蕇hi毖映の掠齭hi间。

d.原yin:未使用试剂盒de清洗液清洗。

解决办法: 请用试剂盒内所提供de清洗液清洗。

e.原yin:试剂盒已过有效qi限。

解决办法:请更换cheng仍在有效qi限内de试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是ping行性不好。

a.原yin:温育位置避光不好或受到气流gan扰。

解决办法: 请确认温育位置ji不透光也不透风(如抽ti内)

b.原yin:caozuoshi间拖太jiu。

解决办法:请在方法shu练后zai进行caozuo。

c.原yin:微孔间xiang互污ran。

解决办法: 加yang品蔮ao胄⌒奈鸾Τ鑫⒖淄猓詍ianzaocheng其它微孔de污ran。

d.原yin:标准品或酶标记物所加入de量不一致。

解决办法:请使用已xiao正过de移液qiang,并确bao其yu吸头zhi间有高度密合性。

e.原yin:tian加yang品或试剂decaozuo方法不正确。

解决办法:加yang品或试剂蔮ao非胛鸾哟ノ⒖住Ⅻ/span>

f.原yin:洗板过程fa生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)

解决办法:请suishi监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。

3. 吸光值junpian高(或线性不够陡)

a.原yin:室温太高(>25)

解决办法: 若无法絛ang褪夷谖露龋胧shi眘uo短步骤4de温育shi间。

b.原yin:底物溶液受到污ran。

解决办法: 若fa现底物溶液已呈现淡蓝se,请不要zai使用。

c.原yin:反yingshi间超过太jiu。

解决办法:请控制反yingshi间。

d.原yin:酶标记物污ran了盒内其它试剂。

解决办法:使用过de吸头ying立即丢qi,可避mian试糽iang鋢iang互污ran,凡是试剂(特别是酶标记物yu底物溶液)接触过de容器ying立即清洗gan净。(先以漂白水浸泡,zai以清水冲洗gan净,可确bao无残liu)

4. yin性标准品de吸光謉ang蛓u阳性标准品de吸光值。

a.原yin:微孔中de试剂未能chong分混合。

解决办法: 试糽iang油旰螅枨崆门趟膠hou使其chong分混合junyun。

b.原yin:洗板过程fa生问题(2-f.)

解决办法:请can考2-f.

c.原yin:tian加yang品或酶标记物de量不一致。

解决办法: 请can考2-d.

 

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