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大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联免疫xi附检测试ji盒

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bbin注ce名chen: 大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联免疫xi附检测试ji盒
bbin注ce型号: CABIN1
bbin注cezhan商: ELISA试ji盒
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简单jie绍

ca88


大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联免疫xi附检测试ji盒  de详细jie绍

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒

使用说明shu

预期应用

本试ji盒运用双bbin网址夹心ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他sheng物液体中钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)含量。

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒基本原理:

本试ji盒采用双bbin网址夹心ELISA法。用抗大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)bbin网址包被于酶标板上,实验时样品或标zhun品中de大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)与包被bbin网謋ang岷希卫雂e成穤hi幌慈ァi次jia入sheng物素化de抗大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)bbin网址和辣根过氧化物酶标记deqin和素。抗大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)bbin网址与结合在包被bbin网址上de大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)结簒iheng物素与qin和素特yi性结合而xing成**复合物,游离de成穤hi幌慈ァia入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶de催化下呈现蓝色,jia终止液hou变成huang色。用酶标仪在450nmbo长处测OD值,大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)浓度与OD450值之间呈zhengbi,通过绘制标zhun曲线jisuan出样品中大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)de浓度。

描述:

ying文名chen Rat CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit
謝ing拿鹀hen 大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附测定试ji盒
货号 X-EL-R0133c 种属 Rat/大鼠
guige 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测fang法 双bbin网址夹心法
检测范围 0~ 灵敏度 0

组成:

謝ing拿鹀hen

ying文名chen

guige

保存

  ELISA酶标板(可chai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标zhun品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标zhun品&样品xi释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩sheng物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化bbin网址xi释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物xi释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

fan应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板fumo

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注ce说明shu

Product  Description

  1 

 

质检bao告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打kai包装hou请及时检查所觴ing锲穝hi否qi全完整)
#: 
一zhou内使用可存于4℃,需长时间存放或多次使用jianyi存于-20.                                      

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒检测前zhun备工作:

1. 请提前20分钟cong冰箱中取出试ji簒iao琾ingheng至室温。

2. 将浓缩洗涤液用双zheng水xi释(1:25)。蝐ong猛阣e放回4℃。cong冰箱中取出de浓缩洗涤液可能you结晶,属于zhengchang现xiang,可用40℃水浴微jia热使结晶完全溶解houzai配制洗涤液(jia热温度瞙ui猚hao过50℃,使用时洗涤液应为室温)。礲i帐褂谩

3. 标zhun品: 于10000×g离心1分钟,jia入标zhun品&样品xi释液1.0mL至冻gan标zhun品謝iao齤inguan盖,jing置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶解hou,用移液器将其轻轻混匀(浓度为)。然hou根据需要进行倍bixi蕋ingㄗⅲ翰hui獄hi接在fan应孔中进行倍bixi蕋ingianyi配制成以下浓度:按照xi释fang法图例 标zhun品&样品xi释液zhi接作为空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL标zhun品:取0.5mL10ng/mLde上述标zhun品jia入含you0.5mL标zhun品&样品xi释液deEPguan謝iao煸燃纯桑溆嗯ǘ葃icilei推。 

4. sheng物素化bbin网址工作液:实验前jisuan当次实验所需用量(以100μL/縵hun疲导逝渲剖庇Χ嗯渲?00-200μL。使用前15分钟,以sheng物素化bbin网址xi释液xi释浓缩sheng物素化bbin网址(1:100)成工作浓度。礲i帐褂谩

5. 酶结合物工作液:实验前jisuan当次实验所需用量(以100μL/縵hun疲导逝渲剖庇Χ嗯渲?00-200μL。使用前15分钟,以酶结合物xi释液xi释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

礲i帐褂谩Ⅻspan>

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒标zhun品xi释fang法图例:(以500μL/guan为例,襜u筛菔导视昧坷磝i蕋ing?00μL/guan)

1.使用前将所youde试ji和标本缓man均heng至室温(18-25oC),试ji不能zhi接在37oC溶解。

2.标zhun品(冻gan品):每瓶标zhun品jia入标zhun品xi释液1mL,盖好hou室温jing置大约10分钟,同时fan复颠倒/搓dong以助溶解,其浓度为8000pg/mL。zhun备7gexi释标zhun品deEPguan,每geEPguan中jia入500μLde标zhun品xi释液,如图所shiyi次倍bixi蕋ing陑hun品xi释液(0pg/mL)zhi接作为空白孔。为保证实验结果you效性,每次实验请使用新de标zhun品溶液。

      

1. 在各孔中jia入标zhun品或样品各100μL, 37℃孵育90分钟

2. jia入100μL sheng物素化bbin网址工作液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3次

4. jia入100μL酶结合物工作液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5次

6. jia入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟zuo右

7. jia入50μL终止液,立即在450nmbo长处测量OD值

8. 结果jisuan

一、cao作因素对ELISA结果deying响ELISAcao作步zhou复杂,cao作不当将引qijiao大de误cha。以下叙述各ge步zhou中deying响因素。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.bi色

二、hui区deshe置通chang情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来bao告结果,两者间you一条分界线被chen为“阳性判duan值”(cut-off value,CO值),这shi定性**测定结果bao告deyi据。

三、标本复查ELISA手工检测过程复杂,ying响因素jiao多,即使室内质控在控,襜u赡芤蚩zhun鋍hayi而造成结果dechayi,因cijia大复查力度shi保证结果zhunque性de可靠fang法,bi如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等xiangmude可疑、ruo阳性标本及少见模式de检测结果进行复查。

四、结果判duan和bao告chang用下列几种fang法表shi结果:

1.定性测定

2.半定量测定 结果一般以滴度表shi。

3.定量测定 糲ong靡阎縟e标zhun品作一系列xi释hou进行ELISA测定,绘制标zhun曲线,结果以优羓i炕虻ノ槐韘hi。在ELISA定量检测中每一块fan应板du必xu绘制相应de标zhun曲线。

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒会出现de问题及解决办法:

1. jia入fan应终止液hou,没觴ing庵祷騲i光值偏低。

a.原因:未jia入酶标记物。

解决办法:请按照cao作步zhou进行。

b.原因:试ji盒内容物未能充分回。

解决办法:que定试ji盒内容物回温houzai进行cao作。

c.原因:室温tai低。

解决办法:若室温tai低(<19℃),请于cao作步zhou4,shi当yan长温育时间。

d.原因:未使用试ji盒de清洗液清洗。

解决办法: 请用试ji盒内所提供de清洗液清洗。

e.原因:试ji盒已过you效期限。

解决办法:请更换成仍在you效期限内de试ji盒。

2. 标zhun曲线线性不佳,或shiping行性不好。

a.原因:温育位置避光不好或shoudao气流gan扰。

解决办法: 请que认温育位置既不透光也不透feng(如抽屉内)。

b.原因:cao作时间拖tai久。

解决办法:请在fang法熟练houzai进行cao作。

c.原因:微縵hun湎鄅uwu染。

解决办法: jia样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔dewu染。

d.原因:标zhun品或酶标记物所jia入de量瞙ui恢隆

解决办法:请使用已xiaozheng过de移液枪,并que保其与xi头之间yougao度密合性。

e.原因:添jia样品或试jidecao作fang法不zhengque。

解决办法:jia样品或试ji时,xi头请勿接触微孔。

f.原因:洗板过程发sheng问题(如guan路堵sai、洗完板hou未立刻进行下一步zhou)。

解决办法:请随时监控洗板ji洗板过程,洗完hou立即进行下一步zhou。

3. xi光值均偏gao(或线性不够陡)。

a.原因:室温taigao(>25℃)。

解决办法: 若无法降低室内温度,请shi当缩duan步zhou4de温育时间。

b.原因:底物溶液shoudaowu染。

解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请瞙ui獄ai使用。

c.原因:fan应时间chao过tai久。

解决办法:请控制fan应时间。

d.原因:酶标记物wu染了盒内其它试ji。

解决办法:使用过dexi头应立即丢弃,可避免试ji间相huwu染,凡shi试ji(特别shi酶标记物与底物溶液)接触过de容器应立即清洗gan净。(先以漂白水浸泡,zai以清水冲洗gan净,可que保无残留)

4. 阴性标zhun品dexi光值低于阳性标zhun品dexi光值。

a.原因:微孔中de试ji未能充分混簒i

解决办法: 试jijia完hou,需轻敲pan四zhou使其充分混合均匀。

b.原因:洗板过程发sheng问题(同2-f.)。

解决办法:请参考2-f.

c.原因:添jia样品或酶标记物de量瞙ui恢隆

解决办法: 请参考2-d.

注意事xiang:

A 仔细阅读说明shu。

B 检查试ji盒标qian上deyou效期。如果chao过you效期,请勿使用。

C 癱i得鱯huque定所you试jiqi全(数量、体积)。

D 标本制备要gui范,每份标本体积要按2-3ge复孔以上de量制备(贮存),尽量分装zuo备份。duan期内无法实验者,注意低温保存。

E zhun备好所you实验额外所需物品,(bi如移液器,试guan,清洗器,酶标仪)。

F 癱i得鱯hu将所用试jipingheng至室温,根据检测标本数量que定所需试jide量。

G 检查试ji盒内每种试jide贮存条件,保证所you试ji均按照试ji盒内说明shu推荐de条件存储。

H 检查不wen定或者变质de试ji溶液(bi如沉淀或变色)。you些试ji,bi如标zhun品xi释液或者检测xi释液,可能在sheji时就含you沉淀物。所you试ji在祑en朊副臧逯埃匦璩浞只煸取6捎诔恋砦飀e特性,在jia入酶标板之前,必需不ting搅拌。

I 保证充分de孵育时间和温度。

J 莤ing鹗褂貌煌瑂heng产批号de试ji取代现you试ji或混合现you试ji。

K 在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产sheng。

L 在实验kai始之前,安排好实验流程。

M 在实验kai始之前,清jie工作tai。

N 若觴ing侍猓τ胛襣ongsi或代理商de技术支持联系

大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒结果判duan:

1. 每ge标zhun品deOD值减去空白孔deOD值hou作图,如she置复孔,ze应取其ping均值jisuan。以标zhun品de浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标zhun曲线。yi可以OD值为横坐标,标zhun品de浓度为纵坐标,绘出标zhun曲线。

2. 推荐使用专业de曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标zhun曲线查出相应de浓度,乘以xi释倍数ui嗫山穌eOD值代入标zhun曲线deni合fang程式,jisuan出样品浓度,zai乘以xi释倍数,即为样品de实际浓度。

3. 若样品OD值gao于标zhun曲线上限,应shi当xi释hou重测,jisuan浓度时应乘以xi释倍数。

 特yi性:

本试ji盒用于检测大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1),经检测与其它相似物质无明显交叉fan应。

由于shoudao技术及样本来源de限制,不可能完成对所you相关或相似物质交叉fan应检测,因ci本试ji盒you可能与未经检测de其它物质you交叉fan应。

回收率:

穤hi鹩诙ㄖ笛寮把局衘ia入一定量de大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)(jia标样品),重复测定并jisuan其均值,回收率为测定值与理lun值debi率

线性:

在定值血清及血浆样本内jia入shi量de大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1),并倍bixi释成 1:21:41:81:16 de待测样本,线性范围即为xi释hou样本中大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)含量de测定值与理lun值debi率。


大鼠钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)酶联**xi附检测试ji盒jing密度:

jing密度用样品测定值de变yi系数 CV 表shi。CV(%) = SD/mean×100

批内cha:取同批次试ji盒对低、中、gao值定值样本进行定量检测,每份样本连xu测定 20 次,穤hi餵isuan不同浓度样本deping均值及 SD 值。

批间cha:选取 3 ge不同批次de试ji盒穤hi鸲缘汀⒅小ao值定值样本进行定量测定,每ge样本使用同一试ji盒重复

测定 8 次,穤hi餵isuan不同浓度样本deping均值及 SD 值。

批内cha: CV<10%

批间cha: CV<12%

wen定性:

经测定,试ji盒在you效期内按推荐温度保存,其活性降低聅hi∮冱span> 5%。

为减小外bu因素对试ji盒po坏前hou检测值deying响,实验室de环境条件需尽量保持一致,you其shi实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行cao作可减少人为误cha。