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大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian免疫xifu检测试ji盒

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bbin注册名chen: 大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian免疫xifu检测试ji盒
bbin注册型号: CAMK2
bbin注册展商: ELISA试ji盒
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大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian免疫xifu检测试ji盒  的详蟜u閟hao

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒

使用shuo明shu

预期应用

本试ji盒运用双bbin网址夹心ELISA法定liang测定大鼠血qing、血浆、组zhi匀浆、细胞lie解液、细胞培养上qing液和其他生物液体中gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)hanliang。

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒基本原理:

本试ji盒采用双bbin网址夹心ELISA法。用抗大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)bbin网址包bei于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)与包beibbin网址结合,游li的成分bei洗去。襩ai渭you肷锼鼗目勾笫骻ai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)bbin网址和纀ei鵪uo氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)bbin网址与结簒ian诎黚eibbin网址上的大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)结合、生物素与亲和素特异性结合而形成**fu合物,游li的成分bei洗去。紋ou離ian色底物(TMB),TMB在纀ei鵪uo氧化物酶的催化xiacheng现蓝色,jia终止液hou变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)浓du与OD450值之间chengzheng比,通guo绘制标准曲线计算出样品中大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)的浓du。

描述:

ying文名chen Rat CAMK2 (Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase-Ⅱ) ELISA Kit
中文名chen 大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu测定试ji盒
huo号 X-EL-R0138c 种属 Rat/大鼠
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双bbin网址夹心法
检测范wei 15.625~1000pg/mL 灵敏du 9.375pg/mL

成:

中文名chen

ying文名chen

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标准品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbin网址稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP胒u岷衔铧/span>

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

胒u岷衔锵∈鸵裹/span>

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

bbin注册shuo明shu

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuo明
*: [96T/48T](打kai包装houqing及时检查所有物品是fuqi全完zheng)
#: 
一周内使用可存于4℃,需长时间存fang或多次使用jian议存于-20.                                      

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒检测前准bei工作:

1. qing提前20分钟从冰箱中取出试ji簒iao胶庵潦椅隆

2. 将浓缩洗涤液用双zhengshui稀释(1:25)。wei用完的fang回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于zheng常现xiang,可用40℃shui浴微紋ou仁菇峋耆芙鈎ouzai配制洗涤液(紋ou任耫u不yao超guo50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

3. 标准品: 于10000×gli心1分钟,紋ou氡曜计?amp;样品稀释液1.0mL至冻干标准品謝iao齤in管盖,静zhi10分钟,上xia颠倒数次,待其充分溶解hou,用移液器将其轻轻混匀(浓du为1000pg/mL)。然hou根ju需yaojin行倍比稀蕋ingㄗⅲ翰粂ao直接在反应kong中jin行倍比稀蕋ingian议配制成以xia浓du:按照稀释方法图例 标准品&样品稀释液直接作为空白kong0ng/mL。如配制5ng/mL标准品:取0.5mL10ng/mL的上述标准品紋ou雋an有0.5mL标准品&样品稀释液的EP管謝iao煸燃纯桑溆嗯╠u襩ai死嗤啤?nbsp;

4. 生物素化bbin网址工作液:实验前计算当次实验所需用liang(以100μL/kong计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?5分钟,以生物素化bbin网址稀释液稀释浓缩生物素化bbin网址(1:100)成工作浓du。当日使用。

5. 胒u岷衔锕ぷ饕海菏笛榍凹扑愕贝问笛樗栌胠iang(以100μL/kong计),实际配制时应多配制100-200μL。使觤en?5分钟,以胒u岷衔锵∈鸵合∈团ㄋ鮄RP胒u岷衔?1:100)成工作浓du。

当日使用。

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒标准品稀释方法图例:(以500μL/管为例,ye可根ju实际用lianglai稀蕋ing?00μL/管)

1.使觤en敖械氖詊i和标本缓man均衡至室温(18-25oC),试ji不能直接在37oC溶解。

2.标准品(冻干品):每瓶标准品紋ou氡曜计废∈鸵裹span>1mL,盖好hou室温静zhi大约10分钟,tong时反fu颠倒/搓动以助溶解,其浓du为1000pg/mL。准bei7ge稀释标准品的EP管,每geEP管中紋ou挈span>500μL的标准品稀释液,如图所shi襩ai伪侗认∈ting曜计废∈鸵裹span>(0pg/mL)直接作为空白kong。为保证实验结果有xiao性,胟an问笛閝ing使用xin的标准品溶液。

      

1. 在各kong中紋ou氡曜计坊蜓犯?00μL, 37℃孵育90分钟

2. 紋ou?00μL 生物素化bbin网址工作液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3次

4. 紋ou?00μL胒u岷衔锕ぷ饕海?nbsp;37℃孵育30分钟

5. 洗涤5次

6. 紋ou?0μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右

7. 紋ou?0μL终止液,li即在450nm波长处测liangOD值

8. 结果计算

一、cao作yin素duiELISA结果的影响ELISAcao作步骤fu杂,cao作不当将引起较大的误cha。以xia叙述各ge步骤中的影响yin素。

1.jia样

2.温育

3.洗涤

4.xian色

5.比色

二、灰区的shezhi通常qing况xia,ELISA定性实验以“yang性”和“阴性”lai报告结果,两者间有一条分界线beichen为“yang性判断值”(cut-off value,CO值),这是定性**测定结果报告的yiju。

san、标本fu查ELISA手工检测guo程fu杂,影响yin素较多,即使室内质控在控,ye可能yinkong间cha异而zao成结果的cha异,yincijia大fu查lidu是保证结果准确性的可靠方法,比如duiHBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可yi、弱yang性标本及少见模式的检测结果jin行fu查。

si、结果判断和报告常用xia列几种方法biaoshi结果:

1.定性测定

2.ban定liang测定 结果一般以滴dubiaoshi。

3.定liang测定 即用已知liang的标准品作一系列稀释houjin行ELISA测定,绘制标准曲线,结果以优羓i炕虻ノ籦iaoshi。在ELISA定liang检测中每一kuai反应板都bi须绘制xiang应的标准曲线。

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒会出现的问题及解jue办法:

1. 紋ou敕从χ罩挂篽ou,没有xi光值或xi光值pian低。

a.原yin:wei紋ou朊副昙俏铩

解jue办法:qing按照cao作步骤jin行。

b.原yin:试ji盒内容物wei能充分回。

解jue办法:确定试ji盒内容物回温houzaijin行cao作。

c.原yin:室温tai低。

解jue办法:ruo室温tai低(<19℃),qing于cao作步骤4,shi当延长温育时间。

d.原yin:wei使用试ji盒的qing洗液qing洗。

解jue办法: qing用试ji盒内所提供的qing洗液qing洗。

e.原yin:试ji盒已guo有xiao期限。

解jue办法:qinggeng换成仍在有xiao期限内的试ji盒。

2. 标准曲线线性不jia,或是平行性不好。

a.原yin:温育位zhi避光不好或受到气流干rao。

解jue办法: qing确认温育位zhi既不透光ye不透风(如抽屉内)。

b.原yin:cao作时间拖tai久。

解jue办法:qing在方法熟练houzaijin行cao作。

c.原yin:微kong间xiang互wu染。

解jue办法: jia样品时,qing小心勿溅出微kong外,以免zao成其ta微kong的wu染。

d.原yin:标准品或酶标记物所紋ou氲膌iang不一致。

解jue办法:qing使用已xiaozhengguo的移液qiang,bing确保其与xi头之间有高du密合性。

e.原yin:添jia样品或试ji的cao作方法不zheng确。

解jue办法:jia样品或试ji时,xi头qing勿接触微kong。

f.原yin:洗板guo程发生问题(如管lu堵塞、洗完板houweili刻jin行xia一步骤)。

解jue办法:qing随时监控洗板机洗板guo程,洗完houli即jin行xia一步骤。

3. xi光值均pian高(或线性不gou陡)。

a.原yin:室温tai高(>25℃)。

解jue办法: ruo无法降低室内温du,qingshi当缩短步骤4的温育时间。

b.原yin:底物溶液受到wu染。

解jue办法: ruo发现底物溶液已cheng现淡蓝色,qing不yaozai使用。

c.原yin:反应时间超guotai久。

解jue办法:qing控制反应时间。

d.原yin:酶标记物wu染liao盒内其ta试ji。

解jue办法:使用guo的xi头应li即丢弃,可避免试ji间xiang互wu染,fan是试ji(特别是酶标记物与底物溶液)接触guo的容器应li即qing洗干净。(先以漂白shui浸泡,zai以qingshui冲洗干净,可确保无残留)

4. 阴性标准品的xi光值低于yang性标准品的xi光值。

a.原yin:微kong中的试jiwei能充分混合。

解jue办法: 试jijia完hou,需轻敲盘si周使其充分混合均匀。

b.原yin:洗板guo程发生问题(tong2-f.)。

解jue办法:qing参考2-f.

c.原yin:添jia样品或酶标记物的liang不一致。

解jue办法: qing参考2-d.

注意事项:

A 仔细阅秎iao得鱯hu。

B 检查试ji盒标签上的有xiao期。如果超guo有xiao期,qing勿使用。

C 按shuo明shu确定所有试jiqi全(数liang、体积)。

D 标本制beiyao规范,每份标本体积yao按2-3gefukong以上的liang制bei(贮存),尽liang分装zuobei份。短期内无法实验者,注意低温保存。

E 准bei好所有实验额外所需物品,(比如移液器,试管,qing洗器,酶标仪)。

F 按shuo明shu将所用试ji平衡至室温,根ju检测标本数liang确定所需试ji的liang。

G 检查试ji盒内每种试ji的贮存条件,保证所有试ji均按照试ji盒内shuo明shu推荐的条件存储。

H 检查不wen定或者变质的试ji溶液(比如沉淀或变色)。有些试ji,比如标准品稀释液或者检测稀释液,可能在she计时就han有沉淀物。所有试ji在祑en朊副臧逯埃琤i需充分混匀。而you于沉淀物的特性,在紋ou朊副臧逯埃琤i需不ting搅拌。

I 保证充分的孵育时间和温du。

J qie勿使用不tong生产批号的试ji取代现有试ji或混合现有试ji。

K 在混合或溶解蛋白溶液时,避免泡沫产生。

L 在实验kai始之前,安排好实验流程。

M 在实验kai始之前,qing洁工作台。

N ruo有问题,应与我公si或代理商的技术支持lian系

大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒结果判断:

1. 每ge标准品的OD值减去空白kong的OD值hou作图,如shezhifukong,则应取其平均值计算。以标准品的浓du为横坐标,OD值为纵坐标,绘出标准曲线。yi可以OD值为横坐标,标准品的浓du为纵坐标,绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作ruan件,如curve expert 1.3或1.4,在ruan件界面既可根ju样品OD值,you标准曲线查出xiang应的浓du,乘以稀释倍数;yi可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样苀ang╠u,zai乘以稀释倍数,即为样品的实际浓du。

3. ruo样品OD值高于标准曲线上限,应shi当稀释hou重测,计算浓du时应乘以稀释倍数。

 特异性:

本试ji盒用于检测大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2),jing检测与其taxiang似物质无明xianjiao叉反应。

you于受到技术及样本lai源的限制,不可能完成dui所有xiang关或xiang似物质jiao叉反应检测,yinci本试ji盒有可能与weijing检测的其ta物质有jiao叉反应。

回收率:

分别于定值血qing及血浆样本中紋ou胍欢╨iang的大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)(jia标样品),重fu测定bing计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率

线性:

在定值血qing及血浆样本内紋ou雜hiliang的大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2),bing倍比稀释成 1:21:41:81:16 的待测样本,线性范wei即为稀释hou样本中大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)hanliang的测定值与理论值的比率。


大鼠gai/gaidiao素yi赖性蛋白激酶2(CAMK2)酶lian**xifu检测试ji盒jing密du:

jing密du用样苀an舛ㄖ档谋湟煜凳?/span> CV biaoshi。CV(%) = SD/mean×100

批内cha:取tong批次试ji盒dui低、中、高值定值样本jin行定liang检测,每份样本连续测定 20 次,分别计算不tong浓du样本的平均值及 SD 值。

批间cha:选取 3 ge不tong批次的试ji盒分别dui低、中、高值定值样本jin行定liang测定,每ge样本使用tong一试ji盒重fu

测定 8 次,分别计算不tong浓du样本的平均值及 SD 值。

批内cha: CV<10%

批间cha: CV<12%

wen定性:

jing测定,试ji盒在有xiao期内按推荐温du保存,其活性降低率小于 5%

为减小外部yin素dui试ji盒破坏前hou检测值的影响,实验室的环境条件需尽liang保持一致,you其是实验室内温du、shidu及温育条件。其次youtong一实验员laijin行cao作可减少人为误cha。


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