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大鼠钙联蛋白(CNX)酶联免疫吸附jian测试剂盒

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bbin注册名称: 大鼠钙联蛋白(CNX)酶联免疫吸附jian测试剂盒
bbin注册型号: (CNX
bbin注册展shang: ELISA试剂盒
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简单jie绍

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大鼠钙联蛋白(CNX)酶联免疫吸附jian测试剂盒  de详细jie绍

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒

使yongshuo明shu

预期应yong

本试剂盒运yong双bbin网址紉ing命span>ELISAfa定liang测定大鼠xue清、xue浆、组zhi匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液tizhong钙联蛋白(CNX)含liang。

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒基本yuan理:

本试剂盒caiyong双bbin网址紉ing腅LISAfa。yongkang大鼠钙联蛋白(CNX)bbin网址包被于酶标ban上,实验时样pin或标准pinzhongde大鼠钙联蛋白(CNX)与包被bbin网址结合,游离de成分被洗去。依次紋ou肷锼鼗痙ekang大鼠钙联蛋白(CNX)bbin网址和辣根过氧化物酶标jideqin和素。kang大鼠钙联蛋白(CNX)bbin网址与结合在包被bbin网址上de大鼠钙联蛋白(CNX)结簒i⑸锼赜雚in和素特异性结合而xing成**复合物,游离de成分被洗去。紋ou胂陨孜?TMB),TMB在辣根过氧化物酶de催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。yong酶标仪在450nmbochang处测ODzhi,大鼠钙联蛋白(CNX)nongdu与OD450zhi之jian呈正比,tong过绘zhi标准qu线计算出样pinzhong大鼠钙联蛋白(CNX)denongdu。

描述:

英wen名称 Rat CNX (Calnexin) ELISA Kit
zhongwen名称 大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附测定试剂盒
货号 X-EL-R0141c 謟hi簏/span> Rat/大鼠
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方fa 双bbin网址紉ing膄a
jian测范围 0.156~10ng/mL 灵敏du 0.094ng/mL

组成:

zhongwen名称

英wen名称

规格

保存

  ELISA酶标ban(可拆xie)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准pin&样pinxi释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩生物素化bbin网址

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化bbin网址xi释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物xi释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩洗di液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封ban覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

bbin注册shuo明shu

Product  Description

  1 

 

zhijianbaogao

Certificate of Analysis

  1 

 

特别shuo明
*: [96T/48T](打开包装后qing及时jian查suoyou物pinshi否齐全完整)
#: 
yi周内使yong可存于4℃,xuchang时jian存fang或多磜en箉ong建议存于-20.                                      

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒jian测前准备工作:

1. qing提前20分zhong从冰xiangzhongqu出试剂盒,平衡至shi温。

2. jiangnong缩洗di液yong双蒸水xi释(1:25)。未yong完defang回4℃。从冰xiangzhongqu出denong缩洗di液可能you结晶,属于正常现xiang,可yong40℃水浴wei紋ou仁菇峋耆芙夂髗ai配zhi洗di液(紋ou任耫u不要超过50℃,使yong时洗di液应weishi温)。当日使yong。

3. 标准pin: 于10000×g离心1分zhong,紋ou氡曜紁in&样pinxi释液1.0mL至冻干标准pinzhong,xuan紧管盖,静置10分zhong,上下颠倒数次,待其充分溶解后,yong移液器jiang其轻轻混匀(nongduwei10ng/mL)。然后根据xu要jinxing倍比xi释(注:不要直接在反应孔zhongjinxing倍比xi释)。建议配zhi成以下nongdu:按zhaoxi蕋ou絝a图例 标准pin&样pinxi释液直接作wei空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准pin:qu0.5mL10ng/mLde上述标准pin紋ou牒瑈ou0.5mL标准pin&样pinxi释液deEP管zhong,混匀即可,其余nongdu依此类推。 

4. 生物素化bbin网址工作液:实验前计算当磜en笛閟uoxuyongliang(以100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使yong前15分zhong,以生物素化bbin网址xi释液xi释nong缩生物素化bbin网址(1:100)成工作nongdu。当日使yong。

5. 酶结合物工作液:实验前计算当磜en笛閟uoxuyongliang(以100μL/孔计),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使yong前15分zhong,以酶结合物xi释液xi释nong缩HRP酶结合物(1:100)成工作nongdu。

当日使yong。

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒标准pinxi蕋ou絝a图例:(以500μL/管wei例,ye可根据实际yongliang来xi释,如200μL/管)

1.使yong前jiangsuoyoude试剂和标本缓慢均衡至shi温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2.标准pin(冻干pin):每瓶标准pin紋ou氡曜紁inxi释液1mL,盖好后shi温静置大约10分zhong,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其nongduwei10ng/mL。准备7gexi释标准pindeEP管,每geEP管zhong紋ou挈span>500μLde标准pinxi释液,如图suo示依次倍比xi释,标准pinxi释液(0pg/mL)直接作wei空白孔。wei保证实验结果you效性,每磜en笛閝ing使yong新de标准pin溶液。

      

1. 在各孔zhong紋ou氡曜紁in或样pin各100μL, 37℃孵yu90分zhong

2. 紋ou?00μL 生物素化bbin网址工作液,37℃孵yu60分zhong

3. 洗di3次

4. 紋ou?00μL酶结合物工作液, 37℃孵yu30分zhong

5. 洗di5次

6. 紋ou?0μL底物溶液, 37℃孵yu15分zhong左右

7. 紋ou?0μL终止液,li即在450nmbochang处测liangODzhi

8. 结果计算

yi、cao作因素duiELISA结果deying响ELISAcao作bu骤复za,cao作瞙uai眏iangyin起jiao大de误差。以下叙述各gebu骤zhongdeying响因素。

1.加样

2.温yu

3.洗di

4.显色

5.比色

二、灰区de设置tong常情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来baogao结果,两者jianyouyi条分jie线被称wei“阳性判duanzhi”(cut-off value,COzhi),zheshi定性**测定结果baogaode依据。

三、标本复查ELISA手工jian测过cheng复za,ying响因素jiao多,即使shi内zhi控在控,ye可能因孔jian差异而造成结果de差异,因此加大复查力dushi保证结果准确性de可kao方fa,比如duiHBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目de可疑、弱阳性标本及少见mo式dejian测结果jinxing复查。

四、结果判duan和baogao常yong下列几种方fa表示结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果yi般以滴du表示。

3.定liang测定 即yongyi知liangde标准pin作yi系列xi释后jinxingELISA测定,绘zhi标准qu线,结果襷a帕糽iang或单位表示。在ELISA定羕ao觳鈠hong每yi块反应ban都bi须绘zhi相应de标准qu线。

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒会出现dewen题及解决办fa:

1. 紋ou敕从χ罩挂汉螅粂ou吸光zhi或吸光zhi偏低。

a.yuan因:未紋ou朊副阩i物。

解决办fa:qing按zhaocao作bu骤jinxing。

b.yuan因:试剂盒内容物未能充分回。

解决办fa:确定试剂盒内容物回温后zaijinxingcao作。

c.yuan因:shi温太低。

解决办fa:ruoshi温太低(<19℃),qing于cao作bu骤4,适当延chang温yu时jian。

d.yuan因:未使yong试剂盒de清洗液清洗。

解决办fa: qingyong试剂盒内suo提供de清洗液清洗。

e.yuan因:试剂盒yi过you效期限。

解决办fa:qing更换成仍在you效期限内de试剂盒。

2. 标准qu线线性不佳,或shi平xing性不好。

a.yuan因:温yu位置避光不好或受到气liu干扰。

解决办fa: qing确认温yu位置既不透光ye不透风(如抽ti内)。

b.yuan因:cao作时jiantuo太久。

解决办fa:qing在方fa熟lian后zaijinxingcao作。

c.yuan因:wei孔jian相hu污染。

解决办fa: 加样pin时,qing小心勿溅出wei孔外,以免造成其它wei孔de污染。

d.yuan因:标准pin或酶标ji物suo紋ou雂eliang不yi致。

解决办fa:qing使yongyi校正过de移液枪,并确保其与吸tou之jianyou高du密合性。

e.yuan因:添加样pin或试剂decao作方fa不正确。

解决办fa:加样pin或试剂时,吸touqing勿接触wei孔。

f.yuan因:洗ban过cheng发生wen题(如管路堵塞、洗完ban后未li刻jinxing下yibu骤)。

解决办fa:qing随时监控洗ban机洗ban过cheng,洗完后li即jinxing下yibu骤。

3. 吸光zhi均偏高(或线性不够陡)。

a.yuan因:shi温太高(>25℃)。

解决办fa: ruo无fa降低shi内温du,qing适当缩短bu骤4de温yu时jian。

b.yuan因:底物溶液受到污染。

解决办fa: ruo发蟴hi孜锶芤簓i呈现dan蓝色,qing不要zai使yong。

c.yuan因:反应时jian超过太久。

解决办fa:qing控zhi反应时jian。

d.yuan因:酶标ji物污染了盒内其它试剂。

解决办fa:使yong过de吸tou应li即丢弃,可避免试剂jian相hu污染,fanshi试剂(特别蕅iao副阩i物与底物溶液)接触过de容器应li即清洗干净。(先以漂白水jinpao,zai以清水chong洗干净,可确保无can留)

4. 阴性标准pinde吸光zhi低于阳性标准pinde吸光zhi。

a.yuan因:wei孔zhongde试剂未能充分混簒i

解决办fa: 试剂加完后,xu轻qiao盘四周使其充分混合均詑u

b.yuan因:洗ban过cheng发生wen题(同2-f.)。

解决办fa:qing参kao2-f.

c.yuan因:添加样pin或酶标ji物deliang不yi致。

解决办fa: qing参kao2-d.

注意事项:

A 仔细阅读shuo明shu。

B jian查试剂盒标签上deyou效期。如果超过you效期,qing勿使yong。

C 按shuo明shu确定suoyou试剂齐全(数liang、ti积)。

D 标本zhi备要规范,每份标本ti积要按2-3ge复孔以上deliangzhi备(贮存),尽liang分装做备份。短期内无fa实验者,注意低温保存。

E 准备好suoyou实验额外suoxu物pin,(比如移液器,试管,清洗器,酶标仪)。

F 按shuo明shujiangsuoyong试剂平衡至shi温,根据jian测标本数liang确定suoxu试剂deliang。

G jian查试剂盒内每謟hi约羋e贮存条件,保证suoyou试剂均按zhao试剂盒内shuo明shu推荐de条件存储。

H jian查不wen定或者变zhide试剂溶液(比如chen淀或变色)。youxie试剂,比如标准pinxi释液或者jian测xi释液,可能在设计时就含youchen淀物。suoyou试剂在祑en朊副阞an之前,bixu充分混詑u6捎赾hen淀物de特性,在紋ou朊副阞an之前,bixu不停jiao拌。

I 保证充分de孵yu时jian和温du。

J 莤ing鹗箉ong不同生产批号de试剂qu代现you试剂或混合现you试剂。

K 在混合或溶解蛋白溶液时,避免pao沫产生。

L 在实验开始之前,安排好实验liucheng。

M 在实验开始之前,清洁工作台。

N ruoyouwen题,应与我公司或代理shangde技术zhi持联系

大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒结果判duan:

1. 每ge标准pindeODzhi减去空白孔deODzhi后作图,如设置复孔,则应qu其平均zhi计算。以标准pindenongduwei横坐标,ODzhiweizong坐标,绘出标准qu线。yi可以ODzhiwei横坐标,标准pindenongduweizong坐标,绘出标准qu线。

2. 推荐使yong专业dequ线zhi作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件jie面既可根据样pinODzhi,由标准qu线查出相应denongdu,乘以xi释倍数;yi可jiang样pindeODzhi代入标准qu线deni合方cheng式,计算出样苀ang╠u,zai乘以xi释倍数,即wei样pinde实际nongdu。

3. ruo样pinODzhi高于标准qu线上限,应适当xi释后重测,计算nongdu时应乘以xi释倍数。

 特异性:

本试剂盒yong于jian测大鼠钙联蛋白(CNX),经jian测与其它相似物zhi无明显交cha反应。

由于受到技术及样本来源de限zhi,不可能完成duisuoyou相关或相似物zhi交cha反应jian测,因此本试剂盒you可能与未经jian测de其它物zhiyou交cha反应。

回收率:

分别于定zhixue清及xue浆样本zhong紋ou難i定liangde大鼠钙联蛋白(CNX)(加标样pin),重复测定并计算其均zhi,回收率wei测定謉i肜韑unzhide比率

线性:

在定zhixue清及xue浆样本内紋ou胧蔿iangde大鼠钙联蛋白(CNX),并倍比xi释成 1:21:41:81:16 de待测样本,线性范围即weixi释后样本zhong大鼠钙联蛋白(CNX)含liangde测定謉i肜韑unzhide比率。


大鼠钙联蛋白(CNX)酶联**吸附jian测试剂盒精密du:

精密duyong样pin测定zhide变异系数 CV 表示。CV(%) = SD/mean×100

批内差:qu同批磜en约梁衐ui低、zhong、高zhi定zhi样本jinxing定羕ao觳狳/span>,每份样本连续测定 20 次,分别计算不同nongdu样本de平均zhi及 SD zhi。

批jian差:选qu 3 ge不同批次de试剂盒分别dui低、zhong、高zhi定zhi样本jinxing定liang测定,每ge样本使yong同yi试剂盒重复

测定 8 次,分别计算不同nongdu样本de平均zhi及 SD zhi。

批内差: CV<10%

批jian差: CV<12%

wen定性:

经测定,试剂盒在you效期内按推荐温du保存,其活性降低率小于 5%

wei减小外部因素dui试剂盒pohuai前后jian测zhideying响,实验shide环綾heng跫u尽liang保持yi致,you其shi实验shi内温du、湿du及温yu条件。其次由同yi实验员来jinxingcao作可减少萻ong蟛睢


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